嗜水气单胞菌acrA缺失菌株的构建及其生理功能的测定

摘要

AcrA是革兰氏阴性菌中的一种膜融合蛋白,现今关于AcrA蛋白的研究,以AcrA蛋白在细菌中药物外排等膜转运过程中的调节作用为主.为了阐明细菌中acrA基因敲除后,该菌在溶血性、毒理性、压力胁迫性及抗生素敏感性等生理功能的变化,以嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)为研究对象,利用无痕敲除等分子生物学手段构建acrA(AHA_2911)的缺失菌株,并对野生菌株和缺失菌株的溶血性、胞外蛋白酶活、抗生素敏感性、高温胁迫、生长趋势以及生物膜形成能力等生理特性进行了测定.结果 显示,敲除菌株的溶血性和胞外蛋白酶活并未受到影响,但acrA基因敲除后增加了该菌对卡那霉素、罗红霉素、巴罗沙星抗生素及吖啶黄素染料的敏感度并且显著提高了嗜水气单胞菌的生物膜形成能力.但是,AacrA在42℃下的生长趋势及其生物膜形成能力明显弱于野生株.以上研究证明嗜水气单胞菌acrA基因在药物外排泵中有一定的功能,并且提示该基因可能在细菌的高温耐受性及生物膜形成中起重要作用.