一种检测大鲵致病性嗜水气单胞菌的四重PCR法

摘要

建立一种快速诊断致病性嗜水气单胞菌的PCR法.根据嗜水气单胞菌的16S rDNA、外膜蛋白、溶血素及丝氨酸蛋白酶基因设计4对引物,经PCR反应条件优化后进行检测.结果表明,仅嗜水气单胞菌呈阳性,其检测敏感性高,可检测100fg的DNA模板.20株大鲵源嗜水气单胞菌经四重PCR法检测时,有18株呈阳性.其中,毒力基因种类较多的阳性菌株经人工感染试验和胞外产物活性检测时显示出较高的致病性.利用该PCR法进行的其他检测中,还发现33份人工感染样本全部呈阳性,34份疑似样本有21份呈阳性,说明四重PCR法可应用于临床检测.本研究建立的四重PCR法具有高度敏感性和特异性,可用于嗜水气单胞菌快速诊断.