绿色荧光蛋白转基因小鼠骨髓基质细胞体外诱导分化为神经元样细胞

摘要

目的 研究绿色荧光蛋白转基因小鼠骨髓基质细胞(GFP-GM-BMSCs)在体外无血清培养基+细胞因子诱导条件下,向神经细胞分化的能力.方法 用贴壁法体外培养GFP-GM-BMSCs,取第3代GFP-GM-BMSCs,用含浓度均为20μg/L的表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的无血清培养基(Neurobasal-A+2%B27)诱导分化.第5天用免疫细胞荧光方法检测巢蛋白(Nestin)的表达,第10天用神经元烯醇化酶(NSE)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学方法鉴定阳性细胞.结果 GFP-GM-BMSCs经无血清培养基+细胞因子诱导后,细胞胞体变圆,伸出细长突起,有的突起连接成网,呈神经元样形态.诱导第5天,Nestin阳性表达的细胞为40.24%±5.09%;第10天,NSE阳性、GFAP阳性的细胞分别为36.43%±5.27%和49.73%±6.28%.结论 GFP-GM-BMSCs在体外含EGF、bFGF的无血清培养基中,能分化成神经元样细胞.