围生期缺血缺氧性脑病的微RNA生物标志物筛选研究

摘要

目的研究围生期缺血缺氧性脑病(HIE)的微RNA(miRNA)生物标志物的筛选情况。方法通过动态队列研究法获取2020年1月至2021年1月深圳市龙华区中心医院144例HIE病儿作为受试者。将其根据病情严重程度的差异分作轻度HIE组42例、中度HIE组62例以及重度HIE组40例,另取同期该院50例健康新生儿作为对照组。分别采集所有新生儿脐带血进行测序比较分析差异表达miRNA,筛选3个和HIE相关的miRNA作为早期预测HIE的生物标志物,并分析各组新生儿上述3个miRNA表达情况的差异。采用Spearman相关性分析明确HIE病情严重程度和miRNA表达的关系。此外,将所有HIE病儿按照是否合并脏器损伤分为合并脏器损伤组102例以及未合并脏器损伤组42例,比较两组上述3个miRNA表达情况的差异。此外,检测并比较HIE组和对照组血清诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮素-1水平。结果miRNA芯片通过扫描、分析以及标准化处理,结果发现miRNA芯片共检测miRNA达921种。相较于对照组,HIE病儿血浆中有29种miRNA表达异常升高,26种miRNA表达异常下降,选择差异有统计学意义的miRNA实施生物学信息分析,发现了miR-4472、miR-5195-3p以及miR6794-5p可能具有潜在的预测HIE作用。重度HIE组miR-4472、miR-5195-3p以及miR-6794-5p表达水平分别为0.71±0.12、2.34±0.28、2.24±0.24,均高于对照组的0.20±0.04、0.78±0.15、0.47±0.11和轻度HIE组的0.37±0.08、0.92±0.18、0.89±0.15以及中度组的0.55±0.09、1.45±0.23、1.46±0.20,且轻度HIE组、中度HIE组miR-4472、miR-5195-3p以及miR-6794-5p表达水平均高于对照组,中度HIE组miR-4472、miR-5195-3p以及miR-6794-5p表达水平均高于轻度HIE组(均P<0.05)。HIE病儿病情严重程度和miR-4472、miR-5195-3p、miR-6794-5p表达均呈正相关关系(均P<0.05)。合并脏器损伤HIE病儿miR-4472、miR-5195-3p、miR-6794-5p表达水平分别为0.60±0.09、2.05±0.18、1.70±0.31,均高于未合并脏器损伤组的0.46±0.03、1.58±0.12、1.37±0.23(均P<0.05)。HIE组血清iNOS及内皮素-1水平均高于对照组(均P<0.05)。结论HIE的miRNA生物标志物包括miR-4472、miR5195-3p、miR-6794-5p,且上述miRNA表达水平和病儿病情严重程度以及脏器损伤有关,值得临床重点关注。