干扰DOT1 L基因抑制胃癌MGC-803细胞增殖、侵袭和迁移

摘要

目的 观察抑制DOT1L基因表达对胃癌MGC-803细胞增殖、迁移及侵袭的影响,并探讨其机制.方法 采用Western blot检测BGC-823、MGC-803、SGC-7901胃癌细胞系中DOT1L基因的表达量;分别采用Real-time PCR、Western blot检测各组细胞DOT1L mRNA和相关蛋白表达量;通过细胞集落克隆实验和CCK-8法检测细胞增殖能力;通过Tran-swell实验和划痕损伤实验检测细胞侵袭和迁移能力;通过Western blot检测细胞中的上皮间质转化(EMT)相关分子(E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin)的蛋白表达量.结果 DOT1L在3种胃癌细胞中呈不同程度表达,在MGC-803细胞中表达量最高;转染后DOT1L相关蛋白及mRNA的表达能力显著降低(P<0.05);与对照组比较,细胞增殖、侵袭和迁移能力均明显减弱(P<0.05);细胞中N-Cadherin、Vimen-tin蛋白表达减少(P<0.05),E-Cadherin蛋白表达增加(P<0.05).结论 抑制DOT1L基因表达可降低胃癌MGC-803细胞的增殖与集落形成能力;并通过调控N-Cadherin、Vim-entin,E-Cadherin的表达逆转EMT进程,进而减弱胃癌MGC-803细胞的迁移和侵袭能力.