黑曲霉糖化酶高产菌株的糖化酶结构基因的分离及其序列分析

摘要

从糖化酶高产菌株Ｔ２１中分离出染色体ＤＮＡ。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析表明糖化酶结构基因位于约２．５ｋｂ的ＥｃｏＲＩ－ＥｃｏＲＶ片段中，该染色体ＤＮＡ经Ｅｃｏｒ Ｉ，ＥｃｏＲＶ完全酶切后，用琼脂糖凝胶电泳分离，回收２．０－３．０ｋｂ的片段，与载体ｐＢＲ３２２连接后转化宿主菌大肠杆菌ＤＨ５，获得转化子，通过原位杂交，从转化子中筛选出４个阳性克隆。阳性克隆的进一步酶切鉴定及序列分析表明，黑曲霉Ｔ２１糖化