绿色荧光蛋白基因在昆虫细胞中的克隆与表达

摘要

将绿色荧光蛋白（ＧＦＰ）基因亚克隆到转移载体ｐＶＬｎｅｏ的多角体蛋白基因（ｏｃｕ）启动子下游，与杆状病毒ＡｃＮＰＶ ＤＮＡ共转染昆虫细胞，通过同源重组和Ｇ４１８筛选，构建了整合有ＧＦＰ基因的重组病毒。在昆虫细胞中表达的ＧＦＰ，ＭＷ为３０ｋＤａ，在荧光显微镜下呈现美丽的绿色，荧光光谱表明其激发波长３９５ｎｍ，发射波长５０９ｎｍ。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ杂交证明，重组病毒的１ｋｂ ＥｃｏＲＩ片段与Ｇ