HCMVpp65基因在昆虫细胞中的克隆与表达及其重组蛋白的免疫效应研究

摘要

该研究从预防角度出发,着重于诱导机体的细胞免疫,利用基因工程技术对HCMV-pp65疫苗进行研制,并通过动物实验,对该疫苗的免疫效应进行初步评估.试图为预防母体原发性HCMV感染,从而根本上避免先天性HCMV感染寻找新的有效途径.结论:(一)应用PCR技术已成功获取目的基因HCMV pp65,所得序列与标准序列一致;(二)成功地构建了含有目的基因的重组Bacmid,并获得纯的重组病毒;(三)应用杆状病毒真核表达系统,目的基因在昆虫细胞中高效表达,且具有与野生型病毒相同的抗原特异性;(四)重组蛋白不仅能诱发机体特异性的体液免疫反应,而且具有与野生型HCMV pp65相同的CTL识别表位,能诱发机体特异性的细胞免疫反应,因此,不失为临床预防HCMV感染的疫苗候选蛋白之一.应用转座子介导的Bac to Bac杆状病毒重组系统表达目的蛋白,在HCMV基因工程疫苗的制备中具有广阔的前景.

目录

前言

第一章应用PCR技术从粘粒pCM1007和HCMV基因组中获取目的基因HCMV pp65(pp UL83)

第二章HCMV pp65目的基因的克隆与鉴定

第三章HCMV pp65基因重组转座载体pQHY-2及重组Bacmid QHY-3的构建与鉴定

第四章HCMVpp65基因重组病毒对Sf9昆虫细胞的感染及其蛋白表达时像分析

第五章HCMV pp65重组蛋白质的鉴定与纯化

第六章重组蛋白pp65免疫效应的初步研究

参考文献

综述1：HCMV pp65的基础与应用研究

综述2：HCMV疫苗的研究及其在预防先天性HCMV感染中的应用现状

附录

致谢

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