黑曲霉酸性α-淀粉酶基因和糖化酶基因对工业酒精酵母的整合及其共表达

摘要

用PCR合成的黑曲霉(Aspergillus niger)酸性α-淀粉酶(Acid α-amylase)的cDNA,构建了由酵母醇脱氢酶(ADH1)启动子和终止子引导表达,酸性α-淀粉酶自身信号肽序列引导分泌的表达元件,与黑曲霉糖化酶cDNA的表达元件同时插入由酵母rDNA序列引导同源整合的酵母YIp型表达载体pWHY中,构成双基因表达分泌质粒pWAG.采用pWAG与酵母YEp型G418抗性表达质粒的共转化,将两个基因表达元件整合到酒精生产酵母菌株AS2.346的染色体rDNA序列中,获得同时表达胞外酸性α-淀粉酶和糖化酶的双功能酒精酵母工程菌.