芜菁花叶病毒单克隆抗体的制备及检测应用

摘要

先以芜菁花叶病毒(TuMV)免疫BAL B/C小鼠,然后取其脾细胞使之与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选、克隆,获得4株能稳定传代并分泌抗TuMV单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞,并以之制备腹水单抗.4株单克隆抗体腹水ELISA效价在10-5～10-6之间,仅对TuMV起特异性反应.Western blot分析表明,4株单抗都能与TuMV 34kD的外壳蛋白亚基起特异反应.利用TuMV的多抗兔血清和单抗腹水建立了三抗体夹心ELISA检测TuMV的方法,检测病叶的灵敏度为1∶5120倍,检测提纯TuMV病毒绝对量为21.9 ng.利用三抗体夹心ELISA测定出7种作物上有TuMV侵染.