用单克隆抗体作芜菁花叶病毒不同分离物外壳蛋白抗原结构的比较研究

摘要

用芜菁花叶病毒辽宁分离物（ＴｕＭＶ一ＬＮ）、山东分离物（ＴｕＭＶ一ＳＤ）和榨菜分离物（ＴｕＭＶ一ＺＣ）作抗原，分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，经脾细胞与ＳＰ２／Ｏ一Ａｇ１４骨髓细胞融合，共获得７个单克隆抗体分泌细胞株。为研究３个分离物的抗原差异，用胰蛋白酶消化ＴｕＭＶ的外壳蛋白（ＣＰ），分别形成４、２和１条降解带，经ＳＤＳ一１５％ＰＡＧＥ后，转移至硝酸纤维薄膜上，用３个分离物的抗血清和７种单隆抗体分别做Ｗｅｓｔｅｍ一ｂｌｏｔ，结果表明：多抗均能与降解带呈现不同程度的反应；２个单抗反应极弱或不反应；２个单抗与所有降解带反应；３个单抗与不同的降解带呈现的反应。３个ＴｕＭＶ分离物的病毒颗粒与多抗及单抗分别做ＥＬＩＳＡ，结果显示：同源抗血清与抗原的反应都高于与异源抗血清的反应，不同分离物作抗原制备的单抗有交叉反应，但与同源分离物的反应强度远远大于异源分离物。这些结果为ＴｕＭＶ分离物之间的鉴别提供了重要的抗原组成与结构信息。