芜菁花叶病毒

摘要： 为了探究化学试剂处理对植物病毒的钝化作用,以马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)和芜菁花叶病毒(turnip mosaic virus,TuMV)为试验对象,在模式植物本氏烟上研究了亚硝酸盐处理对病毒的钝化作用。结果表明,亚硝酸盐处理PVY后,PVY在本氏烟植株上比清水处理的对照表现出发病症状减轻,甚至不发病现象。而清水处理的对照烟草对PVY病毒比较敏感,植株逐渐形成系统性侵染并最终坏死。亚硝酸盐处理TuMV后,未观察到病毒侵染的症状,也未检测到TuMV病毒。Western blot技术检测亚硝酸盐处理组病毒含量远低于清水处理组,接近健康水平。表明亚硝酸盐对PVY和TuMV具有一定的钝化作用。

摘要： 为调查我国太子参主产区病毒病发生情况,使用RT-PCR法对采自福建省柘荣县,贵州省施秉县、丹寨县和安徽省宣城市的71份具有典型病毒病症状的太子参样品进行检测,并根据CP氨基酸序列对不同地区病毒进行系统进化分析。RT-PCR结果显示,65份样品检出病毒,检出率为91.55%,其中,56份样品检出芜菁花叶病毒Turnip mosaic virus(TuMV),49份样品检出蚕豆萎蔫病毒2号Broad bean wilt virus 2(BBWV2),9份样品检测出黄瓜花叶病毒Cucumber mosaic virus(CMV),检出率分别为78.87%、69.01%和12.68%。未检测到烟草花叶病毒Tobacco mosaic virus(TMV)。序列和系统发育进化分析显示,本研究获得的TuMV、BBWV2和CMV与NCBI数据库中的序列相似度较高,核苷酸相似度分别为98.05%~98.98%、93.61%~94.25%和98.02%~99.17%,氨基酸序列相似度分别为:96.14%~97.47%、97.33%~98.50%和98.00%~100%,分别属于World-B组、Ⅰ-a亚组和Ⅱ组。

摘要： 芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)和槟榔坏死环斑病毒(Areca plam necrotic ringspot virus,ANRSV)是马铃薯Y病毒科(Potyviridae)中分别可诱导十字花科作物和槟榔产生坏死病症的2种不同属病毒.VPg(Viral protein genome linked)作为与马铃薯Y病毒科病毒基因组5′端的结合蛋白,在病毒复制、翻译和运动等侵染过程中发挥重要作用.本研究利用In-Fusion克隆策略分别构建了可表达3′端融合Strep蛋白标签序列的ANRSV和TuMV VPg全长编码基因的马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)载体pPVX-VPg-AR和pPVX-VPg-Tu.通过农杆菌渗透注射接种本生烟(Nicotiana benthamiana),利用RT-PCR、Strep蛋白标签亲和层析和Western blot等方法证明了PVX病毒载体能够介导VPg-AR和VPg-Tu蛋白在本生烟中系统表达,且发现这2种VPg蛋白的过量表达诱导本生烟叶片产生了不同程度的系统性坏死病症.进一步采用DAB和NBT染色,在产生坏死症状叶片中检测到大量活性氧(reactive oxygen species,ROS)的积累.因此,推测VPg可能是TuMV和ANRSV诱发植物病症产生的一个决定因子,为后续研究这2种病毒诱导症状形成机制奠定了基础.

摘要： 为探究温度和植物抗性的相互作用,本研究对本氏烟(Nicotiana benthamiana,Nb)被芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)侵染后在不同温度下的表现进行实验,通过分子研究手段测定了温度对植物抗病毒能力的影响.结果显示,与常温(23°C)处理相比,病毒侵染在高温(30°C)处理下被抑制;且高温处理下水杨酸羟化酶(NahG)转基因烟草更显著.进一步检测表明,高温能够显著提高NahG烟草中抗氧化酶的活性.在侵染后期,高温促使染病植株中茉莉酸(Jasmonic acid,JA)相关基因表达显著上调.同时,RNA沉默相关基因的表达量在高温处理下的NahG烟草中均上调.上述结果表明,高温通过刺激RNA沉默及相关抗逆激素途径提高了植株对病毒的抗性.

摘要： 为明确柘荣县太子参携带芜菁花叶病毒情况,采用RT PCR法对不同太子参植株进行芜菁花叶病毒检测.结果表明:同株太子参有无病斑的叶片、根部、茎部都可检测到病毒;未表现病毒症状与表现病毒症状太子参植株的9个部位均可检测到病毒,未表现病毒症状的太子参植株中叶脉及茎下部病毒含量相对较高;不同海拔地区种植的太子参植株10个部位均可检测到病毒,花部位的病毒含量相对较少;对不同生长期太子参定株叶片进行病毒检测发现生长末期部分植株未检测到病毒,除此之外所取样品均携带芜菁花叶病毒.

摘要： 2015-2017年对采自山东、河南、辽宁、黑龙江及陕西等省份的具有TuMV症状的大白菜、萝卜样品进行检测,测序获得了214个TuMV CP序列.系统进化分析显示3个特点:各地大白菜、萝卜TuMV CP序列分离物大致归属于world-B和basal-BR 2个组;TuMV分离物归属既有寄主关联性,又有地域性;同一地点的物种内TuMV分离物表现较好的一致性,但也存在多样性.研究结果为十字花科蔬菜抗TuMV育种提供理论依据.

摘要： 热休克蛋白40(HSP40)因其蛋白家族含有保守的J结构域又被称为DnaJ蛋白,其同源蛋白被称为DnaJ-like蛋白.研究表明,DnaJ蛋白家族响应了多种病毒的侵染,但发挥作用的方式各不相同.芜菁花叶病毒(TuMV)是一类重要的蔬菜病毒,给蔬菜生产造成严重经济损失.DnaJ-like蛋白是否响应TuMV侵染,是否在TuMV侵染过程中发挥作用目前尚不清楚.本实验在本氏烟中克隆了分属DnaJ蛋白A类亚家族和B类亚家族的16条基因;qRT-PCR分析表明,DnaJ-like蛋白家族基因在TuMV侵染后表达上调.分别沉默2个亚家族的典型基因NbJ1和NbJ5后,TuMV在沉默植株上的病毒积累量显著较少.结果表明,DnaJ-like蛋白可能在TuMV侵染过程中发挥作用,这为深入了解TuMV的致病机制提供了新思路.

摘要： 宁德师范学院生物系和福建省特色药用植物工程技术研究中心研究人员针对不同产地栽培的太子参中主要存在芜菁花叶病毒和蚕豆萎蔫病毒侵染且为害严重的情况,建立能同时检测这2种病毒的双重RT-PCR快速检测方法。

摘要： 十字花科蔬菜病毒病又称孤丁病、抽疯病,在我国蔬菜主产区普遍发生。2016年2月,我们对陕西省十字花科蔬菜病毒病进行了大面积调查,调查对象包括大白菜、萝卜、甘蓝和油菜。经查证,十字花科蔬菜病毒病主要有烟草花叶病毒、芜菁花叶病毒、黄瓜花叶病毒、烟草环斑病毒和苜蓿花叶病毒。

摘要： 目的:建立并应用太子参中芜菁花叶病毒的检测技术.方法:采用RT-PCR技术,设计特定引物从太子参病株中的不同部位扩增特定片段,并且进行序列分析和比对.结果:序列比对结果表明,扩增得到的片段为芜菁花叶病毒外壳蛋白基因序列片段,本研究建立了一种简便可靠太子参中芜菁花叶病毒的检测方法,并且从太子参根、茎、叶和花中均检测到病毒目标序列.

摘要： 芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus，TuMV)是马铃薯Y病毒属(Potyviridae)的一个重要成员，主要侵染十字花科蔬菜，是一种十分重要的植物病毒(王圣玉等，1990)。本文综述了TuMV生物学特性，TuMV基因组结构，TuMV株系划分及芸薹属作物抗芜菁花叶病毒研究进展。

摘要： 芜菁花叶病毒(TuMV)是不结球白菜最主要的病原物之一，因此，TuMV病毒病抗性的研究一直是不结球白菜抗病育种的主要目标。分子标记辅助选择，是提高不结球白菜抗病育种效率的重要手段。本研究以不结球白菜感病品种‘香青菜’和抗病品种‘泰三抗’为亲本，构建F2群体，经田间鉴定，F2代满足3∶1的抗感分离比，表明不结球白菜对TuMV的抗性由显性单基因控制。采用分离群体分组分析法(BSA)，筛选到一个与TuMV抗病基因紧密连锁的SSR标记DBC87，其连锁距离为8.7cM。

摘要： 本文使用ACD公司提供的芜菁花叶病毒抗体建立斑点酶联检测技术,并比较两种方法的优缺点.采用两种方法对表现叶片褪绿的建兰样品进行检测,结果均表明有2％的检测样品中收到该病毒侵染.

摘要： 解析了芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)的HC-Pro蛋白酶结构域的晶体结构。利用大肠杆菌表达了一个包含蛋白酶结构域的片段，并获得了高分辨率的晶体，另外利用硒代晶体和SAD法解析了相位，最终优化的结构分辨率为2.0埃。这个结构是个紧凑的α/β折叠，代表了该酶完成自我切割后的构象。结构显示切割后的碳端尾巴还紧紧结合在活性位点，阻止了其他底物的进入，这种自抑制状态解释了为什么HC-Pro只有分子内切割的活性，而不能切割其他底物。以前发现HC-Pro切割位点附近的指纹序列为:Tyr-X-Val-Gly/Gly(其中X代表非特异性识别的氨基酸)，切割发生在两个甘氨酸之间。解释了P1、P2和P4位氨基酸的保守性，这些位置残基的侧链分别包埋在特定大小的口袋中。另外P3位残基的侧链暴露在溶液中，这和该位置序列的不保守性也一致。

摘要： 本文对90个芜菁花叶病毒分离物的P1、CP基因相对密码子频率的偏性进行了分析,同时还利用了系统发育学的方法对此90个芜菁花叶病毒分离物的P1、CP基因序列进行了分析.分析结果显示这些分离物的P1、CP基因相对密码子频率的使用模式与系统进化树的分类具有很高的保守性,间接表明了密码子频率偏性可能影响芜菁花叶病毒基因序列的进化.

摘要： 在北京东郊自然发病,表现严重花叶症状的萝卜(Raphanus sativus L.)上获得一病毒分离物,经生物学、血清学和分子生物学鉴定,初步确定为芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV).以萝卜发病叶片总RNA为模板,以马铃薯病毒属简并引物对该病毒分离物基因组3'端进行RT-PCR扩增,获得约1.7Kb片段.

摘要： 芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)是白菜生产中的三大病害之一.TuMV利用白菜的翻译起始因子(eIF(iso)4E)进行复制、翻译及增殖,TuMV株系间的差异在eIF(iso)4E与TuMV互作过程中产生显著影响,因此单点突变体的制备对于研究基因功能的表达至关重要.通过序列比对发现,TuMV C4/CDN1-VPg间存在5个差异氨基酸位点.本研究采用改良的重叠延伸PCR(SOE-PCR)技术,以TuMV C4-VPg基因序列为模板,定点突变核苷酸,获得TuMV CDN1-VPg基因的5个单突变体以及TuMV CDN1-VPg基因全长.该研究为进一步揭示白菜eIF(iso)4E基因与TuMV的互作机制奠定材料基础,同时也建立了一套高效、便捷、经济的DNA定点突变方法.

摘要： 为了研究TuMV与不结球白菜的互作，以TuMV接种的不结球白菜叶片为材料,构建cDNA文库。以TuMV响应基因LRK01为探针,与文库杂交,筛选得到28个阳性克隆,经过测序和同源性比对分析表明,一条编码真核延伸因子Tu(EF-Tu)的基因可能参与了不结球白菜与TuMV的互作。通过酵母双杂交验证了EF-Tu与LRK01互作，实时定量分析显示TuMV侵染抑制该基因的表达。

摘要： 为了研究TuMV与不结球白菜的互作，以TuMV接种的不结球白菜叶片为材料,构建cDNA文库。以TuMV响应基因LRK01为探针,与文库杂交,筛选得到28个阳性克隆,经过测序和同源性比对分析表明,一条编码真核延伸因子Tu(EF-Tu)的基因可能参与了不结球白菜与TuMV的互作。通过酵母双杂交验证了EF-Tu与LRK01互作，实时定量分析显示TuMV侵染抑制该基因的表达。

摘要： 本发明公开了一种南芥菜花叶病毒、菜豆黄花叶病毒和百合无症病毒是否侵染宿主的实时荧光RT-PCR检测方法，本发明根据南芥菜花叶病毒、菜豆黄花叶病毒和百合无症病毒的RNA，设计特异性的扩增引物和荧光探针，并借助扩增引物和荧光探针对待鉴定病毒的RNA模板进行RT-Realt time PCR反应，通过实时对RT-Real time PCR产物的荧光检测，实现对宿主是否被南芥菜花叶病毒、菜豆黄花叶病毒或百合无症病毒侵染的快速检测。

摘要： 本发明公开了一种抗烟草花叶病毒的化合物、制备方法及其用途及含有该化合物的烟草花叶病毒抑制剂。所述化合物的结构式如下：；其制备方法包括样品提取、硅胶柱层析、高效液相色谱分离及凝胶柱层析；所述烟草花叶病毒抑制剂包括以下比例的原料：2.5～10%所述化合物、2.5～10 ppm芸苔素内酯、2～5%氨基寡糖素、20～30%麦芽糖糊精，其余量为水。本发明首次从翅荚决明的枝叶中分离得到一个新骨架类型的化合物，具有显著的抗烟草花叶病毒活性，本化合物在20μM浓度下的相对抑制率为52.3±3.2%，超过对照宁南霉素的相对抑制率33.6±3.0%。本发明烟草花叶病毒抑制剂配方简单、成本低廉，防治烟草花叶病毒的效果可达83.6％，远高于相同浓度的市售的化学防治剂38.5％的抑制率。

摘要： 本发明公开了一种快速同步检测小麦黄花叶病毒和中国小麦花叶病毒的方法，根据两种病毒基因序列的异同点设计了三条引物反向引物CWWY-R2为：5′-GGTTCCMGTTATCGTACT-3′。正向引物CW1-F2：5′-GGAAGGGATGCCATACAACT-3′，WY1-F2：5′-ACCCTACAAACAAACTCTGC-3′，植物总RNA为模板，以CWWY-R2为引物，反转录合成cDNA。然后通过优化建立了一种同步检测两种病毒的反应体系：cDNA1.6μL、引物(10μmol/L)各0.4μL、10×PCR Buffer(不含Mg

摘要： 提供对ToBRFV具有抗性的番茄植物。本发明的烟草花叶病毒组抗性番茄植物中，SlTOM1a基因、SlTOM1c基因和SlTOM1d已丧失功能。

摘要： 本发明公开了一种用于南芥菜花叶病毒、菜豆黄花叶病毒和百合无症病毒是否侵染宿主的RT-PCR方法，本发明根据南芥菜花叶病毒、菜豆黄花叶病毒和百合无症病毒的RNA，设计出特异性的引物，并借助引物对待鉴定病毒的RNA模板进行RT-PCR反应，并将PCR产物电泳成像，根据PCR产物经电泳后显示结果阳性与否，来实现对宿主是否被南芥菜花叶病毒、菜豆黄花叶病毒或百合无症病毒侵染的快速检测。

摘要： 本发明公开了一种南芥菜花叶病毒、菜豆黄花叶病毒和百合无症病毒是否侵染宿主的实时荧光RT-PCR检测方法，本发明根据南芥菜花叶病毒、菜豆黄花叶病毒和百合无症病毒的RNA，设计特异性的扩增引物和荧光探针，并借助扩增引物和荧光探针对待鉴定病毒的RNA模板进行RT-Realt time PCR反应，通过实时对RT-Real time PCR产物的荧光检测，实现对宿主是否被南芥菜花叶病毒、菜豆黄花叶病毒或百合无症病毒侵染的快速检测。

摘要： 本发明公开了一种兼抗黄瓜花叶病毒和烟草脉带花叶病毒的双价弱毒疫苗，所述双价弱毒疫苗含有CMVFny分离物的突变型RNA2；所述CMVFny分离物的突变型RNA2是在CMVFny分离物的RNA2全长序列第2661位之后插入TAATAG以及一段烟草脉带花叶病毒的保守序列；所插入的烟草脉带花叶病毒的保守序列的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述CMVFny分离物的突变型RNA2的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。将本发明的双价弱毒疫苗与含有CMVFny分离物RNA1和RNA3的质粒混合接种，可以预防黄瓜花叶病毒和烟草脉带花叶病毒的危害，为田间防治CMV和TVBMV引起的植物病毒病提供了疫苗材料和有效防治措施。

摘要： 本发明公开了一种兼抗黄瓜花叶病毒和烟草花叶病毒的双价弱毒疫苗，所述双价弱毒疫苗含有CMVFny分离物的突变型RNA2；所述CMVFny分离物的突变型RNA2是在CMVFny分离物的RNA2全长序列第2661位之后插入TAATAG以及一段烟草花叶病毒的保守序列；所插入的烟草花叶病毒的保守序列的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述CMVFny分离物的突变型RNA2的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。将本发明的双价弱毒疫苗是将CMVFny分离物的突变型RNA2与含有CMVFny分离物RNA1和RNA3的质粒混合接种，可以预防黄瓜花叶病毒和烟草花叶病毒的危害。本发明的双价弱毒疫苗对CMV和TMV具有交叉保护效果；为田间防治CMV和TMV引起的植物病毒病提供了疫苗材料和有效防治措施。

摘要： 本发明公开了一种抗烟草花叶病毒的化合物、制备方法及其用途及含有该化合物的烟草花叶病毒抑制剂。所述化合物的结构式如下：；其制备方法包括样品提取、硅胶柱层析、高效液相色谱分离及凝胶柱层析；所述烟草花叶病毒抑制剂包括以下比例的原料：2.5～10%所述化合物、2.5～10 ppm芸苔素内酯、2～5%氨基寡糖素、20～30%麦芽糖糊精，其余量为水。本发明首次从翅荚决明的枝叶中分离得到一个新骨架类型的化合物，具有显著的抗烟草花叶病毒活性，本化合物在20μM浓度下的相对抑制率为52.3±3.2%，超过对照宁南霉素的相对抑制率33.6±3.0%。本发明烟草花叶病毒抑制剂配方简单、成本低廉，防治烟草花叶病毒的效果可达83.6％，远高于相同浓度的市售的化学防治剂38.5％的抑制率。

摘要： 本发明的芜菁花叶病毒外壳蛋白基因和黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因双价抗病载体pCam－TuMVCP－CMVCP是由潮霉素、NoS终止子NoSter、黄瓜花叶病毒CP基因(CMVCP)、35S启动子CaMV35Spro、35S启动子CaMV35Spro、芜菁花叶病毒CP基因(TuMVCP)、NoS终止子NoSter依次连接而成。把芜菁花叶病毒CP基因和黄瓜花叶病毒CP基因共同构建在同一个植物表达载体上，由于CP封闭了病毒基因组的脱壳过程，当入侵病毒的裸露核酸进入植物细胞后，它们立即被细胞中的自由CP所重新包裹，阻止了核酸的复制；CP限制了病毒粒体的扩展与转运，从而提高转基因植物的抗性。