雨生红球藻虾青素酰基转移酶的鉴定与功能研究

摘要

为研究雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)的甘油二酯酰基转移酶(Diacylglycerol acyltransferase,DGAT)是否具有催化虾青素酰基化的功能,首先通过雨生红球藻的cDNA库克隆得到了一个Ⅱ型DGAT编码区全长序列(DGTT2).在甘油三酯(Triacylglycerol,TAG)合成缺陷型酵母Saccharomyces cerevisiae H1246中过表达DGTT2基因发现HpDGTT2不能回补H1246的表型,即不具有典型的DGAT功能.利用分离得到的雨生红球藻的内质网成功地建立了一个体外的虾青素酰基转移酶酶活测定体系,添加含有重组HpDGTT2的酵母细胞的微粒体后虾青素酯的含量显著高于对照,初步表明HpDGTT2具有催化雨生红球藻中虾青素酰基化功能.以上结果为进一步探索雨生红球藻中DGTT2的功能及深入理解虾青素合成在代谢水平的调控奠定了基础.