烟草叶绿体转化载体的构建及转基因植株的获得

摘要

选择烟草叶绿体基因组同源片段ｒｐ１２－ｔｒｎＨ－ｐｓｈｂＡ和ｔｒｎＫ－ＯＲＦ５０９Ａ，及ａａｄＡ抗壮观霉素基因，构建烟草叶绿体转化载体ｐＴＲＺ，制备ｐＴＲＺＤＮＡ金粉子弹，通过基因枪轰击烟草幼苗叶片，经壮观霉素筛选获得了愈伤组织和转化再生植株，对烟草叶绿体转化植株进行ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分析，结果证明其中Ｎｏ１３，１６，２３为整入了外源ａａｄＡ的叶绿体转基植株，同时其子代呈现壮观霉素抗性ａａＤ