慢性缺氧对大鼠肺静脉平滑肌细胞内钙离子浓度的影响

摘要

目的：探索原代培养肺动脉高压模型大鼠肺静脉平滑肌细胞（PVSMCs）是否具有血管平滑肌功能及L型电压依赖性钙通道（VDCC）阻断剂硝苯地平对其细胞内钙离子浓度（[Ca2＋]i）的影响,为慢性缺氧性肺动脉高压发病机制的研究提供理论依据。方法：用显微镜操作和胶原酶消化法分离、培养肺动脉高压模型大鼠肺静脉平滑肌细胞,鉴定培养的细胞及计算纯度,利用细胞内钙离子浓度检测系统观察慢性缺氧对PVSMCs静息[Ca2＋]i的影响及硝苯地平的干预作用。结果：该方法培养的肺动脉高压模型造模的PVSMCs呈典型的平滑肌特性,表现为＂峰-谷＂状生长,免疫化学α-Actin鉴定显色,而且培养纯度达到98%;慢性缺氧能使PVSMCs的静息[Ca2＋]i从（104.3±7.9）nmol/L提高到（197.9±11.8）nmol/L（P〈0.05）;5 mmol/L的硝苯地平能完全阻断慢性缺氧PVSMCs的[Ca2＋]i对高钾溶液的反应。结论：慢性缺氧可使PVSMCs的静息[Ca2＋]i升高,其机制可能与激活PVSMCs的VDCC导致细胞外Ca2＋内流有关。