siRNA干扰对大鼠血管平滑肌细胞活性影响的检测方法

摘要

本发明属于细胞检测技术领域，涉及siRNA干扰对大鼠血管平滑肌细胞活性影响的检测方法。所述的检测方法包括如下步骤：(1)原代培养大鼠血管平滑肌细胞；(2)对大鼠血管平滑肌细胞进行siRNA转染；(3)检测AP‑1及下游基因的mRNA的表达，检测c‑Fos、c‑Jun、AP‑1下游基因的蛋白的表达，检测AP‑1活性；(4)检测大鼠血管平滑肌细胞的细胞周期及增殖的变化，检测细胞迁移情况；(5)检测SM‑αactin的mRNA的表达，检测SM‑αactin的蛋白的表达，观察大鼠血管平滑肌细胞分化情况；(6)检测MMP‑2、TIMP‑2的mRNA的表达，检测MMP‑2和u‑PA的蛋白的表达，分析MMP‑2和MMP‑9活性。利用本发明的检测方法，能够确定siRNA干扰对大鼠血管平滑肌细胞活性影响规律，找到AP‑1+BsiRNA的作用机制。