Nedl1基因敲除鼠匹鲁卡品癫痫模型的建立

摘要

目的 通过Nedl1(NEDD4-like ubiquitin protein ligase-1)基因敲除鼠(Nedl1-/-)构建匹鲁卡品癫痫模型,探讨Nedl1基因与癫痫之间的关系.方法 C57BL/6小鼠通过Cre-Loxp系统构建Nedl1-/-小鼠.选择相同年龄野生型小鼠(Nedl1+/+)及Nedl1-/-小鼠,腹腔注射匹鲁卡品诱导癫痫发作,对两组小鼠癫痫发作情况进行统计,并且对比未造模时及癫痫模型建模1个月后两组小鼠海马Nissl染色、NPY(neuropeptide Y)染色.结果 与Nedl1+/+小鼠相比,Nedl1-/-小鼠癫痫发作等级较轻(P=0.000),癫痫发作次数较少(P=0.004),首次出现3级以上发作的时间较长(P=0.016).癫痫模型建模后Nedl1-/-小鼠全部存活,而Nedl1+/+小鼠死亡率为46.4％.癫痫模型建模后1个月Nissl染色显示Nedl1+/+小鼠海马CA1区细胞计数明显减少,DG区的细胞排列紊乱,明显固缩,Nedl1-/-小鼠海马Nissl染色无明显变化.癫痫模型建模后1个月NPY免疫荧光染色显示Nedl1+/+小鼠苔藓纤维发芽较Nedl1-/-小鼠明显.结论 Nedl1-/-小鼠癫痫发作严重程度以及死亡率明显低于Nedl1+/+小鼠,癫痫模型后1个月,Nedl1-/-小鼠海马神经元损害及苔藓纤维发芽情况较Nedl1+/+小鼠弱.