HBV感染：宿主细胞免疫应答与临床转归

摘要

目的：研究HBV感染后不同临床转归的人群之间细胞免疫状态的差异，探讨慢性HBV感染的免疫学发病机制。 方法：从2005年3月至2007年3月就诊于北京协和医院肝炎门诊的患者中选取31名慢性乙型肝炎患者、15名慢性HBV携带者、20名非活动性HBsAg携带者，并筛选了21名亚临床HBV感染康复者(其中7名为近期康复者)。使用流式细胞仪检测淋巴细胞亚群。使用Elispot法检测HBcAg特异性T细胞的数量。自行设计了包含35条肽段的HBcAg肽段库作为CD8+T细胞的刺激原，按序列先后将肽段分为C1-C12、C13-C24、C25-C35三个肽段池。采用重组HBcAg作为CD4+T细胞刺激原。 结果： 1．慢性乙型肝炎组、慢性HBV携带者组NK细胞计数分别为199/μL±132/μL、187/μL±89/μL，低于HBV康复者组(P<0.05)。慢性乙型肝炎组CD8+CD38+T细胞比例为42.9％±16.7％，显著高于其余各组(P<0.05)。 2．慢性乙型肝炎组、慢性HBV携带者组、非活动性HBcAg携带者组、HBV长期康复者组、HBV近期康复者组HBcAg特异性CD8+T细胞的总反应强度(SFC/10^6PBMC)分别为0(0，0)、0(0，61)、0(0，250)、0(0，38)、268(62、681)；慢性乙型肝炎组的总反应强度与宽度均显著低于非活动性HBsAg携带者和HBV近期康复者。慢性HBV携带者HBcAg特异性CD8+T细胞的总反应强度与宽度也显著低于HBV近期康复者。其中慢性乙型肝炎组对C1-C12、C13-C24两个肽段池的反应强度和应答率均显著低于HBV近期康复者。慢性HBV携带者对C1-C12肽段池的反应强度和应答率显著低于HBV近期康复者。 结论：HBcAg特异性CTL反应对机体清除病毒和抑制病毒复制有重要作用。HBcAg中刺激机体产生免疫应答的抗原位点主要位于C1-C24覆盖的区域内。推测NK细胞减少是导致慢性乙型肝炎、慢性HBV携带者体内HBV病毒载量难以控制，感染慢性化的原因之一。CD8+CD38+T细胞比例升高是慢性乙肝患者体内的免疫病理改变之一。

目录

论文说明：英文缩略词

1研究背景

2材料与方法

2.1研究对象

2.2样本采集和处理

2.3分离及冻存血浆和PBMC

2.4淋巴细胞亚群检测

2.5 ELISpot法测定HBcAg特异性T细胞应答

2.6统计学分析

3结果

3.1淋巴细胞亚群的检测结果

3.2 Elispot方法检测HBcAg特异性T细胞应答结果

4讨论

4.1外周血淋巴细胞亚群的比较

4.2 HBcAg特异性T细胞应答的差异及其意义

5结论

6参考文献

文献综述 获得性免疫在HBV感染中的作用

附录

致谢