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Nisin及D-柠檬烯复合油凝胶纳米乳体系的构建及其抗菌性能研究

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摘要

符号说明

第一章 绪论

1.1 引言

1.2 天然植物精油

1.2.1 D-柠檬烯

1.2.2 牛至精油

1.2.3 百里香酚

1.2.3 植酸

1.3 天然抗菌物质

1.3.1 乳酸链球菌素

1.3.2 壳聚糖

1.3.3 茶多酚

1.4 油凝胶包埋体

1.4.1 凝胶的定义

1.4.2 有机凝聚

1.4.3 有机凝聚的形成机理

1.4.4 有机凝胶的应用

1.5 纳米乳

1.5.1 引言

1.5.2 纳米乳的定义

1.5.3 纳米乳理化性质

1.5.4 纳米乳制备方法

1.5.5 纳米乳的应用

1.6 本课题的研究目的和主要内容

1.6.1 本课题研究目的和意义

1.6.2 本课题主要研究内容

第二章 乳酸链球菌素和D-柠檬烯复合油凝胶纳米乳体系的制备以及稳定性研究

2.1 引言

2.2 实验仪器和材料

2.2.1 主要仪器

2.2.2 材料

2.3 实验方法

2.3.1 包载乳酸链球菌素和D-柠檬烯油凝胶包埋体的制备

2.3.2 高压匀质法制备乳酸链球菌素与D-柠檬烯复合油凝胶纳米乳体系

2.3.2 复合油凝胶纳米乳体系粒径测量

2.3.3 乳类链球菌素和D-柠檬烯复合油凝胶纳米乳稳定性的研究

2.3.4 乳类链球菌素和D-柠檬烯复合油凝胶纳米乳体系浊度测定

2.3.5 乳类链球菌素和D-柠檬烯复合油凝胶纳米乳包埋效果

2.4 结果分析

2.4.1 复合油凝胶纳米乳体系粒径测定

2.4.2 乳类链球菌素和D-柠檬烯复合油凝胶纳米乳稳定性的研究

2.4.3 乳类链球菌素和D-柠檬烯复合油凝胶纳米乳体系浊度测定

2.4.4 乳类链球菌素和D-柠檬烯复合油凝胶纳米乳包埋率测定

2.5 本章小结

第三章 乳类链球菌素和D-柠檬烯复合油凝胶纳米乳乳液体系抗菌性能研究

3.1 引言

3.2 实验材料

3.2.1 主要仪器

3.2.2 主要材料

3.3 实验方法

3.3.1 配制细菌培养基

3.3.2 供试菌种的菌体培养与菌悬液配制

3.3.3 乳酸链球菌素和D-柠檬烯协同抗菌性能研究

3.3.4 乳酸链球菌素与D-柠檬烯复合油凝胶纳米乳体系最小抑菌浓度(MIC)的测定

3.3.5 乳酸链球菌素和D-柠檬烯复合油凝胶纳米乳体系对菌体生长曲线的影响

3.3.6 乳酸链球菌素和D-柠檬烯复合油凝胶纳米乳体系对菌体细胞膜通透性的影响

3.3.7 乳酸链球菌素与D-柠檬烯复合油凝胶纳米乳体系在食品中抗菌效果研

3.4 实验结果与分析

3.4.1 乳酸链球菌素和D-柠柠檬烯协同作用考察

3.4.2 乳酸链球菌素与D-柠檬烯复合油凝胶纳米乳体系最小抑菌浓度(MIC)的测定

3.4.3 乳酸链球菌素和D-柠檬烯复合油凝胶纳米乳体系对菌体生长曲线的影响

3.4.4 乳酸链球菌素与D-柠檬烯复合油凝胶纳米乳体系对菌体细胞膜通透性的影响

3.4.5 乳酸链球菌素与D-柠檬烯复合油凝胶纳米乳体系在食品中抗菌效果研究

3.5 本章小结

第四章 结论与建议

4.1 实验结论

4.2 研究建议

附录

参考文献

致谢

导师与作者简介

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摘要

乳酸链球菌素(Nisin)和D-柠檬烯(D-limonene)两种天然抗菌活性物质都是通过生物技术提取方法提取的天然活性物质,两者的抑菌性能和无毒性,都被世界所公认,随后世界卫生组织也已批准其作为食品添加剂而广泛的运用到食品中。乳酸链球菌素被广泛认同是由于其作为天然抗菌剂对大部分革兰氏阳性菌良好的抑菌活性。乳酸链球菌现已广泛运用到实际的食品中作为抗菌添加剂如巴氏灭菌牛奶、面包、酱汁等等。
  本课题研究利用新型油凝胶纳米乳包载体系包埋乳酸链球菌和D-柠檬烯,并对其稳定性和抗菌性能进行研究,通过高压匀质法制备包埋乳酸链球菌和D-柠檬烯的复合油凝胶纳米乳,并通过改变制备条件得到不同粒径的纳米乳体系,研究其稳定性,通过对体系最小抑菌浓度,生长曲线,扫描电镜和细胞内溶物释放量的测定考察体系整体的抗菌性能和缓释效果,此外,复合油凝胶纳米乳在牛奶等食品中也展现了良好的抗菌效果。取得了以下主要成果:
  1.利用高能乳化法中常用的高压匀质法制备新型复合油凝胶纳米乳,通过对高压匀质时SOR的比,匀质压力和匀质循环次数的改变,研究对其粒径的影响,确定了以SOR比为1∶6,匀质压力为100mPa,循环次数为15次的条件可以制备得到粒径为80nm作用的稳定的复合油凝胶纳米乳体系。
  2.利用荧光标记的方法,通过共聚焦荧光显微镜和外水相荧光含量的测定对新型复合油凝胶纳米乳的包埋效果进行研究考察,结果证明了复合油凝胶纳米乳体系有良好的包埋效果。
  3.通过三种供试菌种生长曲线,复合油凝胶纳米乳对菌种的最小抑菌浓度,考察了新型复合油凝胶纳米乳体系对于微生物菌体的生长情况的影响。实验结果证明复合油凝胶纳米乳体系可以提高两种抗菌剂各自的抗菌性能同时有效的抑制菌体细胞的生长。
  4.通过扫描电镜对三种供试菌体形态变化的观察和细胞内容物释放量的测定,证明了新型复合油凝胶纳米乳剂的高效抗菌作用和抗菌作用机制,证明抗菌剂对于菌体细胞膜的破坏作用。
  5.通过对牛奶为样品的防腐实验来,考察利用新型复合油凝胶纳米乳体系在实际食品应用中的抗菌防腐效果。实验结果表明新型乳酸链球菌和D-柠檬烯复合油凝胶纳米乳在食品中可以有效抑制细菌的生长,充分发挥两种抗菌物质的抗菌活性并达到缓释效果。

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