血源性ACE抑制肽制备工艺及树脂分离规律研究

摘要

血管紧张素转化酶（ACE）在血压调节中扮演着重要的角色，抑制ACE活性可以降低血压。食物源ACE抑制肽可减小化学合成类降压药物的副作用，其研究与开发具有一定的科学和实用价值。本研究以喷雾干燥猪血浆蛋白粉（PPSP）为对象，选用胃蛋白酶作为试验用酶，通过单因素和响应面试验，考察预处理温度、预处理时间、胃蛋白酶添加量（E:S）、酶解温度、酶解底物蛋白浓度、pH和酶解时间对PPSP水解度（DH）和ACE抑制率的影响，优选预处理与酶解工艺条件，建立酶解二次回归模型；并利用大孔吸附树脂（MAR）对酶解产物进行分离纯化，优化分离条件。结果表明：
　　（1）适于胃蛋白酶酶解PPSP制备ACE抑制肽的预处理条件为：80℃水浴中加热20min。
　　（2）适宜的酶解条件为：E:S为3000U?g-1、酶解温度37℃、底物蛋白浓度5%、pH2.5、酶解时间3h；综合影响酶解DH与ACE抑制率的顺序为：pH>E:S>底物蛋白浓度>酶解温度>酶解时间，且其回归模型极显著（P<0.01），回归系数R2=0.969。
　　（3）适于分离纯化PPSP酶解制备ACE抑制肽的树脂为S-8型；静态吸附的上样液pH值为2.5，吸附平衡时间为3.5h；洗脱剂为70%乙醇溶液，解吸平衡时间为30min。
　　（4）在25℃、上样液pH值2.5的条件下，适于S-8动态吸附的上样液浓度为20mg/mL，流速为1.5mL/min；以70%乙醇溶液作为洗脱剂，洗脱液流速为1.0mL/min，动态解吸时间为80min。

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第一章 前言

1.1 猪血浆蛋白及其应用研究

1.2 血管紧张素转化酶（ACE）抑制肽及其研究进展

1.3 大孔吸附树脂（MAR）及其在蛋白肽分离中的应用研究

1.4 本课题的主要研究内容与技术路线

第二章 猪血浆蛋白 ACE抑制肽的工艺研究

2.1 材料与设备

2.2 试验设计

2.3 检测方法

2.4试验结果与分析

2.5 本章小结

第三章 猪血浆蛋白 ACE抑制肽的树脂分离规律研究

3.1 材料与设备

3.2 MAR分离工艺

3.3 试验设计

3.4 检测方法

3.5 试验结果与分析

3.6 本章小结

第四章 结论与展望

4.1 结论

4.2 展望

参考文献

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