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银杏种仁ACE抑制肽的分离纯化、鉴定及抑制机理的研究

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致谢

摘要

第一章引言

1.1银杏简介

1.2银杏种仁的活性成分及主要价值

1.3银杏种仁蛋白的研究现状

1.4生物活性肽的研究

1.4.1生物活性肽的分类

1.4.2 ACE抑制肽的研究现状

1.5降血压机制研究概况

1.5.1高血压现状

1.5.3激肽释放酶激肽系统(KKS)

1.6.2论文的主要研究内容

第二章银杏种仁ACE抑制肽的制备工艺研究

2.1材料与方法

2.1.1材料及主要试剂

2.1.2主要仪器设备

2.1.3银杏脱脂粉的制备

2.1.4银杏蛋白的提取

2.1.5银杏蛋白质含量的测定

2.1.6银杏蛋白的酶解

2.1.7银杏蛋白的水解度测定

2.1.8银杏多肽含量的测定

2.1.9银杏蛋白酶解的单因素实验

2.2结果与讨论

2.2.1单因素试验分析

2.2.2银杏蛋白酶解响应面试验

2.3本章小结

第三章银杏种仁ACE抑制肽的纯化与鉴定

3.1材料与方法

3.1.1材料及主要试剂

3.1.2主要仪器设备

3.2实验方法

3.2.1银杏蛋白水解物的制备

3.2.2银杏种仁ACE抑制肽的分离纯化

3.2.3银杏膜分离组分的氨基酸组成分析

3.2.4 DPPH自由基清除活性的测定

3.2.5羟自由基清除活性的测定

3.2.6 Fe2+螯合活性的测定

3.2.7还原力的测定

3.2.8银杏膜分离组分的体外ACE抑制活性研究

3.2.9银杏种仁ACE抑制肽的结构鉴定

3.2.10银杏种仁ACE抑制肽的合成

3.2.11银杏种仁ACE抑制肽的抑制模式研究

3.2.12银杏种仁ACE抑制肽的分子对接研究

3.3结果与讨论

3.3.1银杏蛋白水解物(GPHs)的水解

3.3.2银杏蛋白水解物(GPHs)的体外ACE抑制活性

3.3.3银杏蛋白水解物的氨基酸组成分析

3.3.4 DPPH自由基清除活性

3.3.5羟自由基清除活性

3.3.6 Fe2+螯合能力

3.3.7铁的还原力

3.3.8银杏蛋白水解物的ACE抑制活性

3.3.9银杏蛋白水解物的纯化

3.3.10银杏种仁ACE抑制肽的鉴定

3.3.11银杏种仁ACE抑制肽的合成

3.3.12银杏种仁ACE抑制肽的抑制模式

3.3.13银杏种仁ACE抑制肽的分子对接

3.4本章小结

第四章银杏种仁ACE抑制肽对人脐静脉内皮细胞的影响

4.1材料与方法

4.1.1材料及主要试剂

4.1.2主要仪器设备

4.2实验方法

4.2.1细胞培养

4.2.2 MTT实验

4.2.6荧光定量PCR(q-PCR)

4.3结果与分析

4.3.1银杏种仁ACE抑制肽对细胞活力的影响

4.3.2银杏种仁ACE抑制肽对细胞形态的影响

4.3.3银杏种仁ACE抑制肽对细胞分泌NO的影响

4.3.4银杏种仁ACE抑制肽对细胞分泌ET-1的影响

4.3.5银杏种仁ACE抑制肽对细胞内ROS的影响

4.3.6银杏种仁ACE抑制肽对EA.hy926细胞调节血压相关基因表达的影响

4.4本章小结

第五章结论与展望

参考文献

攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况

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