远东拟沙丁鱼酶解产物的降血压效果评价及其ACE抑制肽的分离纯化与鉴定

摘要

以远东拟沙丁鱼肌肉为原料,采用动物蛋白水解酶和风味蛋白酶联合水解制备其酶解产物(简称为SMMH),SMMH通过截留分子量分别为10 kDa和3 kDa超滤膜进行分离,获得3个组分,分别称为A(Mw＞ 10kDa)、B(3 kDa＜Mw ＜10 kDa)和C(Mw＜3 kDa).以体外血管紧张素转移酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制率为指标,评价其活性.结果显示:C的ACE抑制率最大,为71.4％,A的ACE抑制率最低,为34.6％.为了进一步评价组分C降血压效果,以原发性高血压大鼠为模型,采用灌胃方式,研究其短期(10 h)与长期(28 d)降血压功效,结果显示:灌胃3种剂量组分C对SHRs大鼠的收缩压有显著降低作用,并且随着剂量的增加,降血压作用越显著.为了确定C组分降血压肽的结构,采用凝胶色谱、离子色谱、反向高效液相色谱相结合对其进行了分离纯化,获得了2个较纯的组分,经电喷雾质谱鉴定,一种为Lys-Val-Glu-Pro-Leu-Pro,另一种为Pro-Ala-Leu,它们的IC50分别为22.9 μmol/L和12.2 μmol/L.