符号说明
第一章 绪论
1.1前言
1.2蛋白内含子介绍
1.2.1蛋白内含子的发现
1.2.2蛋白内含子基本结构特征
1.2.3蛋白内含子的分类
1.3蛋白内含子剪接机制
1.3.1蛋白质的顺式剪接
1.3.2蛋白质的反式剪接
1.3.3蛋白内含子断裂反应
1.4蛋白内含子的应用
1.4.1蛋白内含子应用于蛋白连接
1.4.2蛋白内含子应用于毒素蛋白制备
1.4.3蛋白内含子应用于蛋白纯化
1.4.4蛋白内含子应用于多肽或蛋白质的环化
1.4.5蛋白内含子应用于蛋白质修饰标记
1.4.6蛋白内含子应用于基因治疗
1.4.7蛋白内含子应用于抗体重组
1.4.8蛋白内含子可控剪接目的蛋白
1.5本课题研究内容与意义
1.5.1研究内容
1.5.2研究意义
第二章 实验材料和方法
2.1实验材料和仪器
2.1.1菌株、质粒
2.1.2主要试剂
2.1.3常用仪器和设备
2.1.4本实验所用试剂配制
2.2本课题相关实验技术
2.2.1感受态细胞的制备
2.2.2质粒抽提
2.2.3 DNA胶回收
2.2.4 PCR反应
2.2.5 PCR产物回收
2.2.6酶切与连接
2.2.7化学法转化质粒
2.2.8菌液PCR鉴定
2.2.9蛋白纯化
2.2.10蛋白凝胶电泳
2.2.11蛋白免疫印迹
2.2.12体内重组表达质粒的构建
2.2.13体外重组表达质粒的构建
2.2.14体内重组蛋白表达
2.2.15体外重组蛋白表达与纯化
2.2.16目标蛋白的体外剪接
第三章 实验结果与分析
3.1重组表达质粒的鉴定
3.1.1目标基因的PCR产物扩增
3.1.2重组表达质粒酶切鉴定
3.2重组蛋白的表达与剪接分析
3.2.1 SX及CE在IgG1铰链区序列TCPPCP的剪接分析
3.2.2 SX及CE在IgG2铰链区序列ERKCCV的剪接分析
3.2.3 TX及CE在IgG4铰链区序列ESKYGPPCPSCP的剪接分析
3.3分析与讨论
第四章 总结与展望
4.1结论
4.2展望
参考文献
致谢
东华大学;
