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L--阿拉伯糖异构酶酶学性质表征及乳清粉生物合成D--塔格糖的研究

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第一章 绪 论

1.1 稀有糖

1.2 D-塔格糖概述

1.2.1 D-塔格糖理化性质

1.2.2 D-塔格糖的生理功能

1.2.3 D-塔格糖在食品中的应用

1.2.4 D-塔格糖的代谢途径

1.2.5 D-塔格糖的生产制备

1.3 L-阿拉伯糖异构酶

1.3.1 L-AI的性质

1.3.2 L-AI的微生物来源

1.4 乳清粉生物合成D-塔格糖

1.4.1 β-半乳糖苷酶概述

1.4.2乳清粉制备D-塔格糖

1.5 本课题研究目的和意义

1.6 本课题研究内容和技术路线

第二章 产D-塔格糖乳酸菌的筛选与鉴定

2.1 引言

2.2 实验材料

2.2.1样品来源及主要试剂

2.2.2培养基及试剂的配制

2.2.3主要仪器及设备

2.3 实验方法

2.3.1菌种富集及初筛

2.3.2菌种复筛

2.3.3菌株的分类与鉴定

2.4 结果和讨论

2.4.1菌种初筛及复筛

2.4.2菌落形态及生理生化鉴定结果

2.4.316S rDNA序列结果及系统发育树构建

2.5 本章小结

第三章 青春双歧杆菌L-阿拉伯糖异构酶酶学性质研究

3.1 引言

3.2 实验材料

3.2.1 菌株和质粒

3.2.2 主要酶及试剂

3.2.3 培养基及试剂的配制

3.2.4 主要仪器及设备

3.3 实验方法

3.3.1 目的基因的扩增

3.3.2 重组菌株的构建与筛选

3.3.3 重组BAAI的表达及纯化

3.3.4 BAAI酶活测定

3.3.5 BAAI质谱与生物信息学分析

3.3.6 BAAI酶学性质研究

3.3.7 底物-BAAI蛋白分子模拟对接

3.3.8 纯酶转化生产D-塔格糖

3.4 结果和讨论

3.4.1 重组质粒的构建

3.4.2 BAAI的表达纯化及酶活测定

3.4.3 BAAI的质谱与生物信息学分析

3.4.4 BAAI的酶学性质研究

3.4.5 底物-蛋白分子模拟对接

3.4.6 BAAI底物转化率研究

3.5 本章小结

第四章β-半乳糖苷酶联合L-阿拉伯糖异构酶基因工程菌转化乳清粉合成D-塔格糖

4.1 引言

4.2 实验材料

4.2.1菌株及质粒

4.2.2主要酶及试剂

4.2.3培养基及试剂的配制

4.2.4主要仪器设备

4.3 实验方法

4.3.1 目的基因的扩增

4.3.2 重组菌株的构建与筛选

4.3.3 LPAI的表达与SDS-PAGE

4.3.4 静息细胞的制备

4.3.5 SHB、Semi-SSB及SSB的比较

4.3.6 SSB条件优化

4.3.7 两阶段SSB生产D-塔格糖

4.3.8 分析方法

4.4 结果和讨论

4.4.1重组E. coliBL21/pANY1-Lp-araA的构建

4.4.2 重组LPAI的表达

4.4.3 标准曲线的绘制

4.4.4 SHB、Semi-SSB及SSB的比较

4.4.5 SSB条件优化

4.4.6 SSB最优条件下生产D-塔格糖

4.4.7 两阶段SSB高效生产D-塔格糖

4.5 本章小结

第五章 全文总结与展望

5.1 主要结论

5.2 主要创新点

5.3 全文展望

参考文献

致谢

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著录项

  • 作者

    张国艳;

  • 作者单位

    江苏大学;

  • 授予单位 江苏大学;
  • 学科 食品科学与工程
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 齐向辉;
  • 年度 2020
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 TS2TQ1;
  • 关键词

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