声明
英文缩略语说明
第一章 绪 论
1.1 稀有糖
1.2 D-塔格糖概述
1.2.1 D-塔格糖理化性质
1.2.2 D-塔格糖的生理功能
1.2.3 D-塔格糖在食品中的应用
1.2.4 D-塔格糖的代谢途径
1.2.5 D-塔格糖的生产制备
1.3 L-阿拉伯糖异构酶
1.3.1 L-AI的性质
1.3.2 L-AI的微生物来源
1.4 乳清粉生物合成D-塔格糖
1.4.1 β-半乳糖苷酶概述
1.4.2乳清粉制备D-塔格糖
1.5 本课题研究目的和意义
1.6 本课题研究内容和技术路线
第二章 产D-塔格糖乳酸菌的筛选与鉴定
2.1 引言
2.2 实验材料
2.2.1样品来源及主要试剂
2.2.2培养基及试剂的配制
2.2.3主要仪器及设备
2.3 实验方法
2.3.1菌种富集及初筛
2.3.2菌种复筛
2.3.3菌株的分类与鉴定
2.4 结果和讨论
2.4.1菌种初筛及复筛
2.4.2菌落形态及生理生化鉴定结果
2.4.316S rDNA序列结果及系统发育树构建
2.5 本章小结
第三章 青春双歧杆菌L-阿拉伯糖异构酶酶学性质研究
3.1 引言
3.2 实验材料
3.2.1 菌株和质粒
3.2.2 主要酶及试剂
3.2.3 培养基及试剂的配制
3.2.4 主要仪器及设备
3.3 实验方法
3.3.1 目的基因的扩增
3.3.2 重组菌株的构建与筛选
3.3.3 重组BAAI的表达及纯化
3.3.4 BAAI酶活测定
3.3.5 BAAI质谱与生物信息学分析
3.3.6 BAAI酶学性质研究
3.3.7 底物-BAAI蛋白分子模拟对接
3.3.8 纯酶转化生产D-塔格糖
3.4 结果和讨论
3.4.1 重组质粒的构建
3.4.2 BAAI的表达纯化及酶活测定
3.4.3 BAAI的质谱与生物信息学分析
3.4.4 BAAI的酶学性质研究
3.4.5 底物-蛋白分子模拟对接
3.4.6 BAAI底物转化率研究
3.5 本章小结
第四章β-半乳糖苷酶联合L-阿拉伯糖异构酶基因工程菌转化乳清粉合成D-塔格糖
4.1 引言
4.2 实验材料
4.2.1菌株及质粒
4.2.2主要酶及试剂
4.2.3培养基及试剂的配制
4.2.4主要仪器设备
4.3 实验方法
4.3.1 目的基因的扩增
4.3.2 重组菌株的构建与筛选
4.3.3 LPAI的表达与SDS-PAGE
4.3.4 静息细胞的制备
4.3.5 SHB、Semi-SSB及SSB的比较
4.3.6 SSB条件优化
4.3.7 两阶段SSB生产D-塔格糖
4.3.8 分析方法
4.4 结果和讨论
4.4.1重组E. coliBL21/pANY1-Lp-araA的构建
4.4.2 重组LPAI的表达
4.4.3 标准曲线的绘制
4.4.4 SHB、Semi-SSB及SSB的比较
4.4.5 SSB条件优化
4.4.6 SSB最优条件下生产D-塔格糖
4.4.7 两阶段SSB高效生产D-塔格糖
4.5 本章小结
第五章 全文总结与展望
5.1 主要结论
5.2 主要创新点
5.3 全文展望
参考文献
致谢
在学期间发表的学术论文及其他科研成果
江苏大学;