生物素、牛磺酸与婴幼儿配方奶粉中牛磺酸标准物质研制及分析方法研究

摘要

本研究完成了生物素、牛磺酸以及婴幼儿配方奶粉中牛磺酸基体标准物质的研制。采用红外光谱法与核磁共振波谱法对生物素、牛磺酸两种纯度标准物质候选物进行了定性分析;分别采用高效液相色谱法与差示扫描量热法、超高效液相色谱法与高效毛细管电泳法进行了标准物质的定值;采用超高效液相色谱法与超高效液相色谱与质谱联用法对婴幼儿配方奶粉中牛磺酸成分进行了定值;对3种标准物质进行了均匀性检验、稳定性考察和不确定度评定。标准物质研制符合JJF1343-2012标准物质定值的通用原则及统计学原理与JJF1006-1994国家一级标准物质研制技术要求。两种纯度标准物质的研制填补了国际空白;婴幼儿配方奶粉中牛磺酸基体标准物质的研制填补了国内空白。标准物质可用于相关成分的测定以及分析仪器校准、分析方法确认与评价、仲裁检测以及相关生产部门和实验室质量控制等。
　　 本研究建立了生物素纯度测定的差示扫描量热法(DSC)，测定条件为升温速率1℃/min，样品量1 mg，氮气流速为20 mL/min。纯度测定结果的相对标准偏差(RSD)为0.02％(n=6)。
　　 本研究建立了高效液相色谱电雾式检测器直接测定牛磺酸纯度的方法。该方法在1.0μg/mL～100.0μg/mL的浓度范围内呈线性，线性相关系数R2=0.9999。精密度、重复性、稳定性试验的相对标准偏差分别为0.018％、0.026％、0.024％。
　　 本研究建立了利用超高效液相色谱电雾式检测器直接测定婴儿配方奶粉中牛磺酸含量的方法。该方法回收率为96.3％-99.4％，线性范围是1～25μg/mL。检测限为0.1μg/mL和定量限为0.5μg/mL;本研究建立了超高效液相色谱串联质谱法测定婴儿配方奶粉中牛磺酸含量的方法。回收率为96％～100.9％，线性范围是1×10-3μg/mL～50×10-3μg/mL。检测限为23×10-9mg/g和定量限为52×10-9mg/g。该两种方法直接、快速、便捷、易操作，克服了常规色谱测定方法需衍生化后测定，操作繁杂，耗时长与不能的缺点。方法使用NIST SRM1849a进行了验证，并测定了12种市售奶粉。

目录

声明

致谢

摘要

第一章 综述

1．1 生物素与牛磺酸研究概况

1．1．1 食品营养与功效成分概述

1．1．2 生物素概述

1．1．3 牛磺酸概述

1．2 标准物质研究概况

1．2．1 标准物质的定义

1．2．2 标准物质的分级

1．2．3 标准物质的种类

1．2．4 与标准物质相关的国际导则

1．2．5 标准物质的制备和定值

1．2．6 生物素、牛磺酸标准物质概况

1．3 论文的研究目的、内容与成果

1．3．1 研究目的

1．3．2 研究内容

1．3．3 研究成果

第二章 标准物质的研制

2．1 标准物质原料的获得、制备和纯化

2．2 定性分析

2．3 标准物质均匀性检验

2．4 标准物质稳定性考察

2．5 定值

2．5．1 主成分定值方法的选择与定值结果

2．5．2 标准物质主成分定值方法建立与确认

2．6 标准物质不确定度评定

2．6．1 定值过程带来的不确定度

2．6．2 定值结果的不确定度

2．6．3 均匀性与稳定性引入的不确定度

2．6．4 标准物质的不确定度

2．6．5 扩展不确定度

第三章 生物素标准物质的研制

3．1 原料获得及制备

3．2 定性分析

3．3 定值分析

3．3．1 主要仪器与试剂

3．3．2 质量平衡法

3．3．3 差示扫描量热法

3．3．4 生物素标准物质定值方法的研究与选择

3．3．5 定值结果

3．4 均匀性检验

3．5 稳定性考察

3．6 不确定度评定

3．6．1 标准物质定值过程带来的不确定度

3．6．2 均匀性与稳定性不确定度

3．6．3 标准物质不确定度结果

3．6．4 扩展不确定度

3．7 结论

第四章 牛磺酸标准物质的研制

4．1 原料获得及制备

4．2 定性分析

4．3 定值分析

4．3．1 主要仪器与试剂

4．3．2 超高效液相色谱法(UPLC)

4．3．3 高效毛细管电泳法(HPCE)

4．3．4 牛磺酸标准物质定值方法的研究与选择

4．3．5 其它杂质的测定

4．3．6 定值结果

4．4 均匀性检验

4．5 稳定性考察

4．6 不确定度评定

4．6．1 牛磺酸标准物质定值过程带来的不确定度

4．6．2 牛磺酸标准物质均匀性与稳定性不确定度评定

4．6．3 牛磺酸标准物质不确定度结果

4．7 结论

第五章 婴幼儿配方奶粉中牛磺酸基体标准物质的研制

5．1 原料获得及制备

5．2 定值

5．2．1 主要仪器与试剂

5．2．2 超高效液相色谱法串联质谱法

5．2．3 超高效液相色谱法

5．2．4 婴幼儿配方奶粉中牛磺酸基体标准物质定值结果

5．3 均匀性检验

5．4 最小取样量试验

5．5 稳定性考察

5．6 婴幼儿配方奶粉中牛磺酸基体标准物质不确定度评定

5．6．1 婴幼儿配方奶粉中牛磺酸基体标准物质定值过程带来的不确定度

5．6．2 婴幼儿配方奶粉中牛磺酸基体标准物质均匀性与稳定性不确定度评定

5．6．3 婴幼儿配方奶粉中牛磺酸基体标准物质不确定度结果

5．7 结论

第六章 超高效液相色谱电雾式检测器检测法测定婴幼儿奶粉中牛磺酸

6．1 前言

6．2 仪器与试剂

6．3 实验部分

6．3．1 牛磺酸标准储备液的配置溶液的配置

6．3．2 样品前处理

6．4 结果与讨论

6．4．1 前处理方法的选择

6．4．2 色谱柱的选择

6．4．3 流动相的梯度选择

6．4．4 标准曲线和线性范围

6．4．5 重复性和稳定性试验

6．4．6 方法回收率

6．4．7 最低检出限与定量限

6．4．8 方法验证

6．4．9 实际样品的测定

6．5 结论

第七章 超高效液相色谱串联质谱法测定婴幼儿奶粉中的牛磺酸

7．1 前言

7．2 仪器与试剂

7．3 实验部分

7．3．1 牛磺酸标准储备液的配置溶液的配置

7．3．2 样品前处理

7．4 结果与讨论

7．4．1 前处理方法的选择

7．4．2 色谱柱的选择

7．4．3 流动相的梯度选择

7．4．4 标准曲线和线性范围

7．4．5 重复性和稳定性试验

7．4．6 方法回收率

7．4．7 最低检出限与定量限

7．4．8 方法验证

7．4．9 实际样品的测定

7．5 结论

第八章 结论

参考文献

符号索引

攻读硕士学位期间发表的学术论文