维生素B1转运蛋白THI10结构的研究

摘要

维他命是动物和其他生物饮食中不可或缺的重要成分，VB1是其中之一，它与多种细胞功能，包括能量代谢、糖和碳骨架的降解相关。另外它还与细胞和组织中及细胞和膜之间的神经交流、免疫系统激活、信号和维护过程相关。正因为VB1如此重要的功能，其在体内的吸收和转运过程才显得那么关键。它的吸收路径相对来说是比较复杂的，由一系列的蛋白参与，包括溶质载体阴离子转运蛋白、碱性磷酸酶转运系统和人神经元外单胺转运家族，其中包含一些多特异性的蛋白。参与VB1吸收的两个原核蛋白的结构被解析，显示这些蛋白结合VB1依靠的是强烈的静电相互作用。高等生物的VB1结合蛋白结构相关信息的缺乏是让我们理解VB1吸收过程的一大瓶颈。
　　THI10是酿酒酵母的VB1转运蛋白，其结构的解析将对我们理解VB1转运机制有所帮助，同时也能提示VB1缺陷疾病的致病机理。

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摘要

第一章 引言

1．1 VB1介绍

1．1．1 背景

1．1．2 VB1在脑和神经组织中的功能

1．1．3 VB1在免疫经组织中的功能

1．1．4 VB1的病理学

1．2 VB1的运输

1．2．1 VB1的吸收、扩散和代谢

1．2．2 VB1借助血液的肠道吸收和扩散

1．2．3 VB1跨膜运输至胞质

1．3 VB1的转运蛋白

1．3．1 SLC19 VB1转运蛋白

1．3．2 VB1转运蛋白结构特征

1．3．3 人神经元外单胺转运蛋白

1．3．4 碱性/酸性磷酸酶转运系统

第二章 实验材料与方法

2．1 THI10蛋白的克隆、表达和纯化

2．1．1 THI10基因的克隆和载体构建

2．1．2 THI10蛋白的表达和纯化

2．1．3 THI10蛋白晶体的生长和数据收集

2．2 THI10结晶添加剂实验

2．3 膜蛋白结构预测实验

第三章 实验结论与分析

3．1 THI10蛋白的表达与纯化

3．2 THI10蛋白晶体的生长与数据处理

3．2．1 THI10蛋白晶体的生长

3．2．2 THI10蛋白晶体数据收集与处理

3．3 THI10蛋白纯化及相关实验

3．3．1 THI10表达条件优化

3．3．2 THI10跨膜结构域预测

3．3．3 THI10截短实验

第四章 总结与展望

4．1 总结

4．2 展望

参考文献

个人简历