功能食品中西地那非酶联免疫检测方法的研究

摘要

本论文通过对西地那非的酶联免疫分析方法进行了深入系统的研究，对西地那非半抗原和人工抗原的设计与合成，制备了高效价和高特异性的西地那非抗体，并对西地那非酶联免疫吸附分析方法内容进行了探讨，建立了一种快速免疫检测分析方法，通过对酶联免疫反应不同反应条件的优化，经优化后的直接竞争酶联免疫方法的IC50为6±0.01μg/kg，IC15为0.6±0.002μg/kg。
　　 在对实际样品进行检测的研究中，由于中成药成分的不同，基质影响也不同，因此选取天津市某药店保健食品专柜中的八种具有代表性的功能食品作为研究对象考查了它们的基质影响极其去除方法。在消除基质影响的研究中，样品经过水和甲醇混合溶液提取后，直接用BSA/PBS稀释10倍后即可消除基质影响。在方法的准确性实验中，在30，60，120μg/kg三个加标水平上ELISA方法的回收率在80％-110％，以高效液相色谱法进行样品的确证实验，结果表明ELISA方法与HPLC方法对八种样品的检测结果的相关系数大于0.98。
　　 通过上述内容的系统性研究，所建立的分析方法可以有效地进行现场快速定性和定量检测，为快速免疫分析方法在食品安全领域的应用奠定了理论基础。