摘要
1．1．1蜂王浆
1．1．2蜂王浆的生物活性
1．2糖蛋白及其糖链的研究
1．2．1糖基化类型
1．2．2 N-糖链的研究方法
1．3糖蛋白中糖链与免疫的关系
1．4研究内容和意义
1．5研究技术路线
第2章蜂王浆主蛋白分离、纯化与鉴定
2．1材料
2．1．1实验试剂
2．1．2实验仪器与设备
2．2实验方法
2．2．2十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE)鉴定
2．2．3蜂王浆蛋白含量的测定
2．2．4蜂王浆总糖含量的测定
2．2．6 LC-MS鉴定MRJP1、MRJP2和MRJP3蛋白
2．3实验结果与讨论
2．3．1聚丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)结果分析
2．3．2蜂王浆蛋白含量的结果分析
2．3．3蜂王浆总糖含量的结果分析
2．3．4蜂王浆中10-HDA含量的结果分析
2．3．5蜂王浆主蛋白鉴定结果分析
2．4本章小结
第3章蜂王浆主蛋白N-糖链的结构表征
3．1实验材料
3．1．2实验设备
3．2实验方法
3．2．1胰蛋白酶酶解
3．2．5质谱分析N-糖链
3．2．6质谱数据解析
3．3结果与讨论
3．3．1 N-糖链结构解析
3．4本章小结
第4章去糖基化对蜂王浆主蛋白1(MRJP1)免疫活性的影响
4．1实验材料
4．1．1实验材料
4．1．2实验试剂
4．1．3实验设备
4．2实验方法
4．2．2 MRJP1多克隆抗体的制备
4．2．3多克隆抗体效价的测定
4．2．4去糖基化MRJP1对过敏原免疫活性影响
4．2．5小鼠免疫方案
4．2．6小鼠血清中蜂王浆主蛋白1特异性IgE含量的测定
4．2．7数据统计学分析
4．3实验结果与讨论
4．3．1 MRJP1抗原表位预测与分析
4．3．2 MRJP1效价评价
4．3．3去糖基化免疫评价
4．3．4小鼠血清中特异性IgE含量分析
4．4本章小结
5．1结论
5．2创新点
5．3展望
参考文献
附录
致谢
声明
