黑曲霉产单宁酶的研究和有机相中固定化黑曲霉细胞生物合成没食子酸丙酯的初探

摘要

该研究以产单宁酶黑曲霉菌株为出发菌,通过诱变选育和产酶发酵工艺优化来提高菌种产酶能力,然后对其进行细胞固定化,应用于有机相生物合成抗氧化剂没食子酸丙酯（propyl gallate,PG）的研究.在前人研究的基础上,构建出单宁酶酶活力测定方法：以PG为底物,紫外光区270nm为测定波长,通过没食子酸丙酯的浓度与吸光值之间的线性关系计算出底物的减少量,从而测得单宁酶酶活力.通过微波诱变与化学诱变相结合的复合选育,最终获得高产单宁酶的黑曲霉L<,21>菌株,产酶可达130.6U/ml.通过6种黑曲霉细胞固定化方法的综合对比,最终选用海藻酸钙包埋法.最后,将固定化黑曲霉L<,21>细胞应用于有机相生物催化合成PG.通过对反应体系的选择以及合成工艺参数的初步优化,可获得20﹪左右的PG产率.

目录

文摘

英文文摘

第一章 绪论

1.1单宁酶的性质

1.1.1单宁酶的物理化学性质

1.1.2单宁酶的酶学性质

1.1.3单宁酶的分子生物学研究

1.1.4单宁酶的催化作用机理

1.2单宁酶的酶活测定方法

1.3单宁酶的生产菌种

1.4单宁酶的生产

1.4.1单宁酶的发酵生产

1.4.2单宁酶的提取与纯化

1.5单宁酶的固定化研究

1.6单宁酶的工业应用

1.6.1饮料工业

1.6.2制革工业

1.6.3食品工业

1.6.4 化妆品业

1.6.5饲料工业

1.6.6化工与制药工业

1.7单宁酶研究的发展趋势

第二章 单宁酶活力测定方法的构建

2.1材料与方法

2.2实验结果与讨论

2.3小结

第三章 微波诱变与化学诱变相结合选育单宁酶高产菌株

3.1材料与方法

3.2实验结果与讨论

3.3本章小结

第四章 黑曲霉L21菌株产单宁酶发酵条件的优化研究

4.1材料与方法

4.2实验结果与讨论

4.2.1发酵条件中单因素的效应

4.2.2正交试验的结果与分析

4.2.3黑曲霉L21菌株的生长产酶曲线

4.3本章小结

第五章 黑曲霉L21菌株固定化细胞的研究

5.1材料与方法

5.2实验结果与讨论

5.2.1黑曲霉L21细胞的不同固定化方法的比较

5.2.2黑曲霉L21的游离细胞与固定化细胞的生长产酶曲线

5.2.3海藻酸钠浓度对固定化黑曲霉L21细胞产酶的影响

5.2.4CaCl2浓度对固定化黑曲霉L21细胞产酶的影响

5.2.5固化时间对固定化黑曲霉L21细胞产酶的影响

5.2.6孢子浓度对固定化黑曲霉L21细胞产酶的影响

5.2.7胶珠接种量对固定化黑曲霉L21细胞产酶的影响

5.2.8单宁酸浓度对固定化黑曲霉L21细胞产酶的影响

5.2.9溶氧量对固定化黑曲霉L21细胞产酶的影响

5.2.10胶珠使用次数对固定化黑曲霉L21细胞产酶的影响

5.2.11正交试验结果与分析

5.2.12优化条件下游离细胞与固定化细胞的产酶曲线

5.2.13黑曲霉L21固定化细胞的菌丝生长过程的研究

5.3本章小结

第六章 有机相固定化黑曲霉细胞生物合成没食子酸丙酯的初探

6.1材料与方法

6.2实验结果与讨论

6.3本章小结

第七章 结论与建议

7.1结论

7.2建议

参考文献

攻读硕士期间发表的论文

致谢