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环境内分泌干扰物双酚A对人子宫内膜细胞SGK1表达的影响

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摘要

缩略词表

前言

1 材料与方法

1.1 实验标本

1.2 实验仪器

1.3 试剂

2 实验方法

2.1 人子宫内膜细胞的分离、培养及鉴定

2.2 BPA对人子宫内膜细胞SGK1的影响

2.3 统计学分析

3 结果

4 讨论

5 结论

参考文献

文献综述 环境内分泌干扰物对子代健康影响的研究进展

作者简介

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摘要

目的:
  建立人子宫内膜细胞体外培养模型,探讨BPA对人子宫内膜细胞SGK1表达的影响,为进一步研究BPA是否通过SGK1干扰子宫内膜容受性而导致不孕提供依据。
  材料与方法:
  构建人子宫内膜细胞体外混合培养方法;实验设对照组及BPA组。对照组使用常规DEME/F12培养液;BPA组分为3组,分别为DEME/F12培养液中加终浓度为0.01 ug/mlBPA、0.1 ug/mlB PA、1ug/mlBPA。BPA干预时间为24小时。检查细胞形态,同时进行角蛋白和波形蛋白免疫荧光染色,为实验的进行提供体外混合人子宫内膜细胞。利用免疫荧光方法测定4组SGK1蛋白表达情况。通过荧光定量PCR技术,检测4组子宫内膜细胞上基因SGK1的mRNA表达水平。
  结果:
  离体培养的人子宫内膜细胞,接种24 h后细胞大多能贴壁。上皮细胞角蛋白呈阳性表达,波形蛋白呈阴性表达;间质细胞波形蛋白呈阳性表达,角蛋白表达阴性。人子宫内膜细胞存在SGK1表达。免疫荧光结果提示,随着BPA暴露浓度的增加,SGK1蛋白荧光强度逐渐下降。RT-PCR结果提示,BPA下调子宫内膜细胞SGK1 mRNA的表达。
  结论:
  BPA影响子宫内膜细胞SGK1蛋白及mRNA的表达,提示BPA暴露可能影响子宫内膜容受性。

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