SGK1超表达对人足细胞合成纤连蛋白的影响

摘要

目的:研究高糖刺激对人足细胞血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1(SGK1)和纤连蛋白(FN)表达的影响,以及SGK1超表达和灭活条件下FN的合成变化,揭示SGK1介导的信号转导途径在高糖诱导足细胞细胞外基质聚集,引发早期糖尿病肾损害过程中的作用.方法:高糖刺激人足细胞24 h,Western blotting方法检测SGK1和FN蛋白水平的表达.利用构建好的SGK1激活型质粒(pIRES2-EGFP-SGK1 SD)、灭活型质粒(pIRES2-EGFP-SGK1KN)和空载体(pIRES2-EGFP)分别转染人足细胞,免疫荧光方法检测足细胞合成FN的水平.结果:人足细胞中存在SGK1的表达,高糖刺激SGK1表达上调(50±4 vs 35±3),与此同时,FN合成亦明显增加(19±4 vs 12±2).SGK1SD转染的足细胞中FN合成明显增加,相反,SGK1KN转染的足细胞中FN合成明显减少.结论:SGK1参与了高糖诱导的人足细胞FN的合成,可能在糖尿病肾病早期足细胞的受损活化过程中发挥重要作用.