八种常用甜味剂对秀丽隐杆线虫N2寿命和肠脂质沉积的影响

摘要

背景与目的：
　　甜味剂(Sweeteners)是赋予食品甜味的食品添加剂，使用广泛，接触人群庞大。糖类甜味剂可以引起肥胖，并增加代谢相关疾病的风险，如葡萄糖可以缩短秀丽隐杆线虫寿命，促进衰老，是可能的环境老化剂(Gerontogens)。非糖类甜味剂因甜度高、用量少、热值低等特点被用来替代糖类甜味剂，常用作糖尿病患者的糖类替代品。近年来有报道非糖类甜味剂也存在负面健康效应，如引起小鼠大脑皮质缺血损伤和损害内皮祖细胞等。但是，目前尚未见非糖类甜味剂对寿命影响的研究报道。本课题研究8种常用甜味剂对秀丽隐杆线虫寿命和老化的生物学标志肠脂质沉积(intestinal fat deposition，IFD)的影响，目的是筛选环境老化剂，并为甜味剂的安全使用提供参考。
　　方法：
　　选择秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans，C.elegans）野生型N2进行实验。选择蔗糖、木糖醇、甜菊苷、阿斯巴甜、三氯蔗糖、糖精钠、甜蜜素、安赛蜜(Acesulfame-K，AceK)等8种常用甜味剂为实验对象。参考《GB2760-2014食品安全国家标准食品添加剂使用标准》等文献确定本研究甜味剂使用剂量。取同步化后的L1期幼虫进行甜味剂处理，记录寿命，取day10成虫检测脂褐质沉积水平，取day0，day1，day3成虫检测摄食量，取day0，day3成虫检测运动频率和油红O染色，通过方差分析、生存分析等统计方法处理数据。
　　结果：
　　甜菊苷低剂量(0.3，1mg/ml)延长N2寿命，而高剂量(10mg/ml)缩短N2寿命，促进摄食，损伤运动能力。糖精钠10mg/ml缩短N2寿命，促进幼虫IFD，损伤运动能力。蔗糖100mg/ml、木糖醇30mg/ml延长N2寿命，幼虫发育迟缓，降低IFD。阿斯巴甜3mg/ml、三氯蔗糖0.03mg/ml和0.1mg/ml延长N2寿命，降低脂褐质沉积，延缓衰老，降低成虫IFD。甜蜜素1mg/ml和10mg/ml延长N2寿命。安赛蜜降低N2脂褐质沉积和IFD，但未影响寿命。
　　结论：
　　在秀丽隐杆线虫模型上，高浓度甜菊苷和糖精钠可以促进衰老，缩短寿命，是可能的环境老化剂;低浓度甜菊苷促进IFD;8种甜味剂高剂量下均不同程度损伤运动能力，增加摄食量;除蔗糖、安赛蜜之外的6种甜味剂均在不同剂量下增加幼虫IFD。

目录

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致谢

摘要

缩略词表

1 引言

1．1 甜味剂

1．2 寿命与衰老

1．3 秀丽隐杆线虫

2 材料与试剂

2．1 实验受试物

2．2 实验生物

2．3 秀丽隐杆线虫及OP50培养相关试剂及配方

2．4 寿命实验相关试剂及配方

2．5 油红O染色相关试剂及配方

2．6 实验仪器与设备

3 实验方法

3．1 实验材料的储备液配制保存

3．2 秀丽隐杆线虫和OP50培养及保存

3．3 秀丽隐杆线虫寿命实验

3．4 秀丽隐杆线虫脂褐质沉积自体荧光定量

3．5 秀丽隐杆线虫在液体中运动频率检测

3．6 秀丽隐杆线虫在固体上运动频率检测

3．7 秀丽隐杆线虫摄食量检测

3．9 数据处理

4 实验结果

4．1 甜味剂对N2寿命的影响

4．2 蔗糖对N2的影响

4．3 木糖醇对N2的影响

4．4 甜菊苷对N2的影响

4．5 阿斯巴甜对N2的影响

4．6 三氯蔗糖对N2的影响

4．7 糖精钠对N2的影响

4．8 甜蜜素对N2的影响

4．9 安赛蜜对N2的影响

5 讨论

6 结论

参考文献

综述

作者简历及在读期间所取得的科研成果