超临界二氧化碳中微生物存活率和生理活性的研究

摘要

该文以啤酒酵母和蓝色梨头霉两类菌种为研究对象,从实验研究和理论分析两个方面详细考察非水溶剂--加压二氧化碳中菌体的存活和生理性质变化,考察的影响因素包括：压力、温度、含水量、pH值和升降压速度等.首先研究了常规条件下游离梨头霉菌丝球和固定化的梨头霉菌的生理活性和生长代谢规律,确定了适宜的初始和转化过程中的pH值、诱导时间、最佳培养基组成和转化条件.重点考察了加压二氧化碳对酵母菌、蓝色梨头霉孢子和菌丝球生理活性的影响.微生物类型、压力、温度、含水量、pH、处理时间和升降压速度均影响到微生物菌体的活性.在不同的条件下,各种因素发挥作用的程度不同.压力从亚接触时间才能在微生物细胞内部建立临界失活浓度,达到此浓度所需的时间随其他条件的不同而有所变化;温度对菌体活性的影响不明显;快速降压促进微生物细胞的失活与破碎,降压速度越快,破碎程度越高.从整体来说经过超临界二氧化碳的处理,微生物的生理活性有不同程度的降低.在超临界二氧化碳处理初期海藻酸钙胶体对固定化梨头霉菌体有一定的保护作用.

目录

文摘

英文文摘

1文献综述

1.1概述

1.2二氧化碳对微生物体生长繁殖的作用

1.3各种条件下高压二氧化碳对微生物活性的影响

1.3.1压力、温度与处理时间的影响

1.3.2菌体细胞所处介质悬浮液的物理化学性质的影响

1.3.3菌体细胞所处固体介质的影响

1.3.4其它影响条件

1.4.氧化碳作用发生的位置

1.4.1细胞的生物膜

1.4.2细胞质中的生物活性酶

1.5氧化碳对微生物体作用的机理

1.5.1新陈代谢控制分析理论

1.5.2作用机理

1.6本文的研究思路

2材料与方法

2.1实验材料

2.1.1菌种

2.1.2试剂

2.1.3仪器

2.1.4培养基

2.1.5菌体染色剂

2.1.6萃取剂及展开剂

2.2菌体培养制备方法

2.2.1梨头霉菌体培养

2.2.2酵母菌培养方法

2.2.3梨头霉固定化菌体的制备方法

2.3操作步骤

2.4菌体生理活性的测定

2.4.1酵母菌的活菌率检测

2.4.2蓝色梨头霉的活体染色观察

2.4.3蓝色梨头霉孢子活菌率的测定

2.4.4梨头霉菌丝球生理活性的检测

2.5氢化可的松的分析方法

2.5.1产物的定性分析

2.5.2薄层层析——紫外分光光度法

2.5.3液相色谱法

3蓝色梨头霉菌体的富集培养及固定化

3.1菌丝球发酵液pH值的变化曲线

3.2 pH值对梨头霉菌丝球转化活性的影响

3.2.1培养液初始pH值的影响

3.2.2转化过程中pH值对转化反应的影响

3.3底物诱导时间对菌体转化活性的影响

3.4梨头霉菌体形态与转化活性的关系

3.4.1转速对菌体形态与转化活性的影响

3.4.2发酵液初始pH值对菌体形态与转化活性的影响

3.4.3孢子悬浮液浓度对菌体形态与转化活性的影响

3.4.4NH4+浓度对菌体形态与转化活性的影响

3.4.5底物添加量对菌体形态与转化活性的影响

3.5利用固定化细胞进行生物转化反应

3.5.1培养基组成的优化

3.5.2固定化菌体生长过程中pH值的变化

3.5.3孢子液浓度对固定化细胞转化活性的影响

3.5.4固定化孢子量对转化活性的影响

3.6小结

4超临界二氧化碳中微生物生理活性的研究

4.1高压二氧化碳对酵母菌的影响

4.1.1不同二氧化碳压力对酵母菌细胞存活率的影响

4.1.2含水量对酵母菌细胞存活率的影响

4.1.3不同的处理时间对酵母菌细胞存活率的影响

4.1.4不同降压速度对酵母菌细胞存活率的影响

4.2高压二氧化碳对蓝色梨头霉生理活性的影响

4.2.1不同压力对蓝色梨头霉菌丝球与孢子生理活性的影响

4.2.2不同处理时间对梨头霉菌丝球与孢子的生理活性的影响

4.2.3菌液不同的pH值对梨头霉菌丝球与孢子的生理活性的影响

4.2.4不同升降压速度对梨头霉菌丝球与孢子的生理活性的影响

4.2.5温度对梨头霉菌丝球生理活性的影响

4.2.6高压二氧化碳对梨头霉固定化菌体生理活性的影响

4.2.7超临界二氧化碳中蓝色梨头霉甾体转化的可行性研究

4.3小结

5结论与展望

5.1论文结论

5.2展望

参考文献

致谢