水果抗氧化活性与成分分析以及对衰老机体抗氧化功能的干预作用

摘要

目的: 测定不同品种水果抗氧化活性以及五种类黄酮物质含量，观察抗氧化活性较强、富含类黄酮物质的水果对衰老机体抗氧化功能的干预作用，并对有关成分进行深入的分离鉴定，旨在为衰老的营养干预和天然食物抗氧化物质的开发利用提供理论依据。 方法: 1.采用FRAP法测定不同品种水果抗氧化活性。 2．以高效液相色谱法进一步分析水果中五种类黄酮物质的含量。 3．选择不同抗氧化活性的水果汁进行一次性灌胃实验，动态观察大鼠外周血抗氧化活性的变化。 4．以老龄大鼠与老年志愿者为研究对象，比较不同抗氧化活性的水果汁对衰老机体抗氧化功能的改善作用。 5．分别以乙酸乙酯和正丁醇为萃取溶剂，对有效水果的相关天然成分进行分离提取，结合液一质联用方法对所得成分进行初步鉴定。 结果: 1.在所测定的30种水果中，山楂抗氧化活性最强，冬枣、番石榴、猕猴桃、桑葚、草莓、石榴等次之，白兰瓜、京欣一号西瓜和柿子最弱，最强与最弱相差95．9倍；水果的抗氧化活性与总多酚、总类黄酮含量呈显著相关关系，而与VC含量没有显著相关性。 2．通过正交实验，确定类黄酮糖甙最佳水解条件为1．6mol／LHCl浓度、4h水解时间、80％(v／v)提取溶剂；不同溶剂萃取水解后类黄酮甙元的效率不同，其中丙酮萃取效率最高；以优化后的色谱条件分析23种水果中的血种类黄酮物质，分别为槲皮素、杨梅黄酮、玉米黄酮、坎二菲醇，芹菜配基。最丰富者为石榴，每lOOg鲜重五种类黄酮物质含量合计高达51．12mg，最低者为黄杏，每lOOg鲜重5种类黄酮物质含量低于5mg；所有水果中均检出了槲皮素，但含量差异较大；坎二菲醇在水果中分布较少，含量也较低；芹菜配基仅在石榴中检出；玉米黄酮和杨梅黄酮分布相对广泛，但含量并不丰富，一般不超过10mg/1OOg。 3．一次性灌胃实验结果提示老龄大鼠与成年大鼠对抗氧化物质的吸收利用能力存在显著差异，对于老龄大鼠宜延长干预时间以观察效果；抗氧化活性较强的水果汁能够显著升高成年大鼠外周血抗氧化活性，其中山楂汁效果最为显著，猕猴桃汁、石榴汁次之，而抗氧化活性较弱的苹果汁、梨汁灌胃后外周血抗氧化活性均没有显著升高，由此初步证明不同抗氧化活性水果汁在改善衰老机体抗氧化功能作用方面存在差异。 4．具有较强抗氧化活性、富含类黄酮物质的石榴汁能够显著提高老龄大鼠外周血抗氧化活性和GSH含量，并能显著降低血清羰基、氧化型低密度脂蛋白含量，对肝、脑自由基水平也具有降低作用，而抗氧化活性较弱、类黄酮物质含量不丰富的苹果汁没有显著效果；外周血淋巴细胞彗星试验结果表明，石榴汁与苹果汁干预均能减轻细胞DNA损伤，而石榴汁的效果更为显著。研究中未发现老龄大鼠血清抗氧化物质VC、VE含量及抗氧化酶活性有显著变化，提示石榴汁在体内抗氧化作用并非通过提高机体抗氧化物质含量或抗氧化酶活性来实现。由于石榴汁富含多酚类物质，因此，推测多酚类物质很可能是石榴汁发挥抗氧化作用的主要功能成分。 5．石榴汁对老年人抗氧化功能改善作用明显优于苹果汁，主要表现为显著提高外周血抗氧化活性、降低血浆羰基含量。其他一些指标也显示了提高或改善的趋势，有必要进一步开展大样本人群干预研究，并适当延长干预时间。 6．根据极性不同，对石榴汁中的多酚类物质采用乙酸乙酯、正丁醇分步萃取富集，并以液一质联用方法分离鉴定。根据质谱提供的主要分子离子峰和一些重要的碎片离子峰信启、，结合紫外光谱，并参阅相关文献报道，初步确定出七种成分，分别为：鞣花酸、Gallagyl、芦丁、芹菜配基、芹菜配基一7-O-D．吡喃葡萄糖苷、3，3’，4’，5，7-五羟基黄烷酮和3，3’，4’，5，7-五羟基黄烷酮．6-D-Ilt'LII吡喃葡萄糖苷。 结论: 不同品种水果体外抗氧化活性差别很大，类黄酮物质含量与分布也有较大差异；具有较强抗氧化活性、类黄酮物质含量丰富的石榴汁对衰老机体抗氧化功能具有一定的改善作用，而抗氧化活性较弱．类黄酮物质含量不丰富的苹果汁该作用不明显；石榴汁中含有鞣花酸、Gallagyl、芦丁、芹菜配基、芹菜配基一7一D—D一吡喃葡萄糖苷、3，3’，4’，5，7．五羟基黄烷酮和3，3’，4’，5，7．五羟基黄烷酮一6一D一吡喃葡萄糖苷等成分。

目录

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英文缩略词表

摘要

前言

第一部分常见水果体外抗氧化活性测定

第二部分常见水果中5种典型类黄酮物质分析

第三部分灌胃不同水果汁对大鼠外周血抗氧化活性的影响

第四部分石榴汁、苹果汁对老龄大鼠抗氧化功能的干预作用比较

第五部分石榴汁、苹果汁对老年人抗氧化功能的干预作用

第六部分石榴汁中有关成分的分离鉴定

结论

参考文献

在学期间发表的综述与论文

致谢