花生衣中原花色素的提取、纯化及其抗氧化活性研究

摘要

我国为花生生产大国，总产量占世界花生产量40％，居世界第1位。花生衣作为花生加工的副产物，产量很大，具有较高的综合利用价值，但目前没有有效的开发出其经济价值，主要用于饲料、燃料。花生衣中含有丰富的原花色素，原花色素为多羟基酚类化合物，衍生于黄烷类化合物，具有较强抗氧化能力，能有效防止氧自由基引发的多种疾病。
　　 本文主要从以下几个方面对花生衣中原花色素进行研究:
　　 1.确定原花色素含量的测定方法。
　　 2.采用乙醇溶剂萃取法对花生衣（脱脂处理后）进行粗提，在单因素试验基础上，通过四因素三水平的响应面试验考察料液比、乙醇浓度、提取时间、提取温度对提取效果的影响，确定最佳萃取工艺条件。
　　 3.采用超声波辅助提取法对花生衣（脱脂处理后）进行粗提，在单因素的试验基础上，固定超声波频率为28KHz，采用正交试验法考察料液比、超声功率、超声时间、超声温度、乙醇浓度对提取效果的影响，确定最佳提取工艺条件。
　　 4.对聚酰胺树脂法纯化花生衣原花色素的工艺进行研究，对提取得到原花色素进行纯化，纯化条件上样流速、洗脱流速、洗脱液丙酮浓度进行单因素试验，在此基础上，设计正交试验，得到最佳纯化条件以及得率和纯度。
　　 5.采用膜分离技术纯化原花色素的工艺进行研究，对提取得到原花色素进行纯化，研究不同孔径膜组件纯化原花色素的效果，确定最佳纯化效果的膜组件，以及不同操作压力、操作温度对纯化花生衣中原花色素得率和纯度的影响。
　　 6.采用超氧阴离子法、羟自由基法和DPPH法测定其体外清除自由基的能力测定原花色素的抗氧化能力并与Vc进行比较。通过与Vc比较，探讨花生衣中原花色素的抗氧化活性。
　　 研究结果表明:
　　 1.采用香草醛-盐酸法测定提取液中的原花色素，试验确定了原花色素标准品测定曲线方程为:A=3.5018C-0.0025(R2=0.9998)，式中:A为吸光度;C为原花色素质量浓度(mg/mL)。
　　 2.用乙醇为提取溶剂，采用响应面法对花生衣中原花色素提取工艺进行优化，得到了各因素及其交互作用在工艺工程中对响应值（即原花色素提取率）的影响，确定各因素和响应值的关系表达式。该方法提取原花色素的最佳工艺参数为:时间为59min，料液比为1∶21，温度为62℃，乙醇浓度为56％，此条件下原花色素提取率为:7.94％。
　　 3.超声波辅助提取花生衣中原花色素，通过正交试验，可以得出各因素对花生衣中原花色素提取率影响作用大小依次为:料液比、功率、时间、温度、乙醇浓度。超声波辅助提取花生衣中原花色素最佳工艺条件为:超声波功率为120W，提取温度35℃，提取时间为5min,料液比为1∶24，乙醇浓度为55％，提取率为11.8％。
　　 4.膜分离技术纯化花生衣试验中，从原花色素得率和纯度角度考虑，HPS-1(截留分子质量1000D)纯化效果最好。研究了其操作压力、操作温度对膜通量及对原花色素得率和纯度的影响，结果表明:膜过滤最佳条件为压力0.54MPa、温度25℃，该条件下花生衣原花色素得率12.1％，其纯度82.9％。
　　 5.聚酰胺柱层析纯化花生衣原花色素试验，正交试验表明，上样流速、洗脱流速、丙酮浓度对原花色素的纯度均有显著影响，其中洗脱流速有极显著影响;各因素对纯度影响作用大小依次为:洗脱流速＞丙酮浓度＞上样流速。原花色素最佳的纯化条件为上样流速为0.81mL/min，洗脱流速为1.1mL/min，丙酮浓度为70％，此条件下原花色素的纯度为90.5％，得率为4.13％。
　　 6.研究花生衣中原花色素的抗氧化能力，采用超氧阴离子法、羟自由基法和DPPH法测定其体外清除自由基的能力，以Vc为对照品，二者对超氧阴离子的IC50分别为0.143mg/mL和0.163mg/mL，对羟自由基的IC50分别为0.097mg/mL和0.12mg/mL，DPPH·自由基的IC50分别为0.274mg/mL和0.306mg/mL，表明花生衣中原花色素对三种自由基有很强的清除能力，具有很强抗氧能力，其抗氧能力强于Vc，是一种天然有效的自由基清除剂。

目录

摘要

文献综述

1 花生衣简述

2 花生衣主要功能成分

3 原花色素概述

4 原花色素的生物利用率、安全性及应用

5 立题意义及主要研究内容

研究内容

1 花生衣中原花色素乙醇溶剂提取工艺优化

1．1 材料与方法

1．2 结果与分析

1．3 讨论

2 超声波辅助提取花生衣中原花色素工艺优化

2．1 材料与方法

2．2 结果与分析

2．3 讨论

3 聚酰胺柱层析纯化花生衣原花色素的研究

3．1 材料与方法

3．2 结果与分析

3．3 讨论

4 膜分离技术纯化花生衣中的原花色素

4．1 材料与方法

4．2 结果与分析

4．3 讨论

5 花生衣中原花色素的抗氧化活性研究

5．1 材料与方法

5．2 结果与分析

5．3 讨论

结论

参考文献

己发表的文章

致谢

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