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【6h】

HBx和HCV核心蛋白在HepG2细胞中协同增强环氧化酶-2的表达

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研究内容

第一部分 载体的构建及鉴定

第二部分 Western blot分析

第三部分 荧光素酶报告载体构建和活性测定

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个人简历及研究成果

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摘要

本研究为研究环氧化酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)在原发性肝细胞性肝癌(HCC)发生中的作用以及HBx和丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白对COX-2表达的影响,构建了可表达HBx和丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白的真核表达载体,并用脂质体法转染HepG2细胞,用Western-blot法检测转染细胞中COX-2的蛋白表达水平。结果显示HBx和HCV核心蛋白均可诱导一定水平的COX-2表达,HBx和HCV核心蛋白诱导COX-2表达比转染空载体细胞分别高3.5倍和2.6倍,不仅如此,发现HBx和HCV核心蛋白共表达诱导COX-2的表达比转染空载体的细胞高6.9倍,提示它们对COX-2的表达存在协同诱导作用。 为进一步研究病毒表达产物诱导COX-2表达的机理,构建了含1.5kb的COX-2启动子荧光素酶报告载体Cox2pro1.5kb/luc,并和表达HCV核心蛋白的真核表达载体共转染HepG2细胞后测定荧光素酶活性,初步结果显示HCV核心蛋白在HepG2细胞中可增强COX-2启动子的活性。

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