吉非替尼联合5-氟尿嘧啶对HEr-1高表达胃癌细胞的研究

摘要

目的：
　　 1.探讨吉非替尼与5-氟尿嘧啶合用对人HER-1高表达胃癌细胞株(SGC-7901)生长及凋亡的影响，进一步探讨它们的抗肿瘤基因学机制。
　　 2.评估吉非替尼和传统化疗药5-氟尿嘧啶合用于HER-1表达阳性胃癌细胞时，各种方案的作用效果及可能的最优合用方案，以便为以后的临床治疗提供细胞学依据。
　　 方法：
　　 1.以Her-1基因高表达的胃癌细胞株SGC7901为研究对象。
　　 2.先用MTT法分别检测吉非替尼单药和5-氟尿嘧啶单药对人胃癌细胞的抑制率，然后再进行两药不同联合方案下胃癌细胞抑制率的MTT实验。
　　 3.使用流式细胞仪测定吉非替尼单药、5-氟尿嘧啶单药及两药不同联合方案下胃癌细胞SGC-7901的凋亡率和细胞周期的分布情况。
　　 4.RT-PCR检测5-FU和吉非替尼单用及联合对胃癌细胞靶蛋白酶mRNA的影响。
　　 结果：
　　 1.MTT显示吉非替尼和5-氟尿嘧啶对胃癌SGC-7901细胞都存在一定的抑制功能，并且增加药物的剂量，细胞的抑制率随也会随之上升。吉非替尼可增强化疗药对HER-1阳性胃癌细胞的毒性作用。先吉非替尼和5-FU联合再序贯使用分子靶向药吉非替尼的方案效果最佳。
　　 2.流式细胞仪测定得出结论如下：吉非替尼单药或5-氟尿嘧啶单药组和联合方案组相比抑制率的差异均存在统计学意义(P＜0.05)。并且两药以不同方案联合组与吉非替尼单药和5-氟尿嘧啶单药组相比，G2/M期和S期的比例降低。
　　 3.RT-PCR结果显示，与5-FU组相比联合组TSmRNA表达显著减少，差异有统计学意义(P＜0.05)。吉非替尼能增强5-FU对胸苷酸合成酶(TSmRNA)表达的抑制。
　　 结论：
　　 吉非替尼联合5-氟尿嘧啶作用于Her-1高表达胃癌细胞，较单用时抑制作用明显增强，且各联合方案之间也存在差异，方案4为最佳。

目录

声明

摘要

主要缩略词

前言

一、实验材料

一、材料

二、主要试剂及仪器

二、实验方法

1．细胞培养

2．MTT检测吉非替尼和5-FU对SGC-7901细胞增殖的影响

3．流式细胞仪(FCM)检测

4．TSmRNA表达的RT-PCR测定

三、结果

1．药物单用对SGC-7901细胞增殖的抑制作用

2．联合用药对SGC-7901细胞增殖的抑制作用

3．流式细胞仪(FCM)结果分析如下：

3． 药物对TSmRNA表达的影响

四、讨论

五、结论

参考文献

综述

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致谢