甘草渣中总黄酮的提取及甘草渣的综合利用

摘要

甘草中的主要有效成分为皂苷类和黄酮类，而以往人们仅对甘草中皂苷类成分作了大量深入的研究，评价甘草的质量也仅以甘草酸的含量作为其质量优劣的标准，显然不够全面。同时，随着药理学的深入研究，表明甘草黄酮类成分是甘草的一类主要活性成分，具有抗炎、抗HIV、抗肿瘤等多种药理作用和广阔的开发及应用前景，已成为当前中药甘草研究的热点。本文以提取过甘草酸的废渣作为原料，采用了不同的方法提取了其中残留的大量甘草总黄酮，结合05年版药典对甘草中黄酮类成分进行研究及其含量测定，为建立甘草黄酮类成分的质量标准提供理论依据.
　　 全文由四部分组成：
　　 第一章通过大量的文献，对国内外中药研究的现状、发展趋势、新型的有效成分提取分离技术及中药甘草的研究现状(包括化学成分、药理作用及其开发应用)以及甘草黄酮的提取技术进行了归纳和总结。在此基础上，归纳了本论文研究课题的立题依据、研究目的、意义及主要内容。
　　 第二章分别采用不同的提取方法提取甘草渣中的黄酮，并进行了含量测定，发现复合酶法提取提取条件温和，有利于甘草黄酮母核活性的保护，提取率较其他提取方法高，确定了最佳提取工艺：固液比1∶20；每克甘草渣用50u/g纤维素酶0.8 ml、120u/g果胶酶30mg的条件下，乙醇浓度95％；温度50℃；酶解时间3h；PH=4.5。
　　 第三章考虑到用复合酶提取用酶的成本问题，本章节结合甘草渣自身的功能特性，利用黑曲霉对甘草渣进行固体发酵产酶，一方面利用其自身产酶酶解细胞的纤维结构，促使有效成分溶出；另一方面，考虑到发酵后的甘草渣有一定的酶活性，且甘草又是一种营养成分很高的中草药，可以考虑将其应用到动物饲料添加剂中。鉴于这两个目的，本实验对发酵工艺进行了探索研究，确定了最佳的发酵工艺为：甘草渣：麸皮=6∶4，硫酸铵2％，磷酸二氢钾0.1％，硫酸镁0.1％，过磷酸钙0.5％，发酵时间3d，接种量6％，1.2倍的加水量。
　　 第四章本章节对提取的甘草总黄酮进行了纯化研究，为规模化生产高浓度的甘草黄酮提供理论依据，分别采用了AB-8大孔树脂和超滤膜法纯化技术，通过上柱前后IR图谱对比发现，纯化后的产品纯度有很大的提高，并以上柱前后甘草黄酮含量的变化为基准，所得产品纯度提高了39.97％；在对超滤膜法纯化甘草黄酮的研究中，以膜通量为超滤效率的优劣评价指标，讨论了不同影响因素下膜通量的大小，确定了最优的纯化工艺：操作压力为0.6Mp，操作温度25～30℃，操作时间30min，提取液浓度在原浓度的基础上稀释3倍。以膜过滤前后甘草黄酮含量变化为基准，测得纯度提高了25.02％。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章文献综述

1.1甘草及其国内外研究概况

1.2酶解技术在中药提取中的应用

1.3固态发酵的研究与应用

1.4黑曲霉概述

1.5大孔树脂在分离纯化天然产物有效成分中的应用研究

1.6超滤膜技术在分离纯化天然产物有效成分中的应用研究

1.7本研究的目的及意义

1.8木文研究的内容及创新

第二章不同提取方法提取甘草渣中总黄酮对比研究

2.1前言

2.2试剂和仪器

2.3甘草黄酮测定方法

2.4不同提取方法的对比研究

2.5结果与分析

2.6实验结果

第三章黑曲霉固体发酵提取甘草渣中的总黄酮及酶活力的测定

3.1前言

3.2材料、药品与仪器

3.3菌种的培养

3.4菌种的活化

3.5固态发酵

3.6 3，5-二硝基水杨酸配制DNS试剂

3.7木聚糖酶活力和纤维素酶活力的测定

3.8甘草总黄酮的提取

3.9紫外分光光度法测定滤液中总黄酮的含量

3.10实验部分

3.11结果与分析

3.12实验结果

第四章大孔树脂和超滤膜技术分离纯化甘草总黄酮

4.1前言

4.2实验材料、仪器

4.3 AB-8大孔树脂纯化甘草总黄酮

4.4超滤实验

4.5结果与分析

4.6实验结果

参考文献

致谢

硕士期间发表论文