共生乳酸菌酵母菌的筛选及产信号分子AI-2的研究

摘要

微生物之间共生的原因复杂，共生机制较多。大多数研究者从营养的相互作用、代谢产物互补方面研究微生物的共生，从群体感应方面研究的还不是很多。本试验以群体感应为着手点对共生菌株进行研究，为从群体感应方面了解共生机理打下基础。
　　对分离自酸马奶酒中9株乳酸菌、8株酵母菌进行潜在共生菌的两次筛选。选出典型共生的乳酸菌酵母菌组合。初次筛选以生理盐水作为对照，添加一方的代谢产物测定另一方稳定期的浊度值及干重值。复筛选取初筛共生效果好的组合，以活菌数为指标。选出的共生组合以哈氏弧菌BB170作为报告菌株分别检测单菌、添加代谢产物的单菌及共培养对单菌产信号分子AI-2的影响。试验结果表明：72组潜在共生组合，初筛中乳酸菌代谢产物对酵母菌生长有促进作用的为12组，酵母菌代谢产物对乳酸菌的生长有促进作用的为34组。其中有相互促进作用的组合只有7组。复筛中乳酸菌和酵母菌共同培养有相互促进作用的组合有3组：LAB4与YST2、LAB7与YST2、LAB9与YST2。选择这3对共生组合进行产信号分子AI-2影响的研究。乳酸菌LAB4、LAB7、LAB9均能产生AI-2信号分子，其中LAB4、LAB7产生AI-2信号分子的能力强于LAB9。菌体生长初期相对发光强度与菌体密度成正相关。3株菌在稳定期（18h）相对发光强度达到最大值。酵母菌YST2不产信号分子AI-2。酵母菌YST2代谢产物均能促进LAB4、LAB7、LAB9这3株乳酸菌产生信号分子AI-2，其中对LAB4、LAB7的促进作用极显著（P<0.01）。共培养YST2与LAB4、YST2与LAB9极显著的（P<0.01）促进了乳酸菌产信号分子AI-2。而YST2与LAB7共培养对乳酸菌产信号分子既有促进作用也有抑制作用。具体原因还待进一步研究。

目录

1 引言

1.1 共生的概念

1.2.1 乳酸菌与乳酸菌、乳酸菌与醋酸菌共生研究进展

1.2.2 乳酸菌与酵母菌的共生研究进展

1.3 细菌群体感应的概况

1.3.1 群体感应中信号分子的分类

1.3.2 群体感应中信号分子的检测

1.4 微生物共生机制的研究进展

1.4.1 营养的相互作用

1.4.2 群体感应中信号分子的交流

1.5 研究目的及意义

2 材料与方法

2.1 材料

2.1.1 试验菌株

2.1.2 标准菌株

2.1.3 培养基

2.1.4 主要仪器与设备

2.2.1 菌种的活化与保藏

2.2.2 共生菌的筛选

2.2.3 共生菌株对产信号分子AI-2的影响

2.2.4 测定指标

2.3 数据统计与分析

3 结果与分析

3.1 共生菌株的筛选

3.1.1 乳酸菌代谢物对酵母菌生长的影响

3.1.2 酵母菌代谢物对乳酸菌生长的影响

3.1.3 共生菌株的二次筛选

3.2.1 乳酸菌产AI-2信号分子检测

3.2.2 酵母菌产AI-2信号分子检测

3.2.3 添加酵母菌代谢产物对乳酸菌产AI-2信号分子的影响

3.2.4 酵母菌乳酸菌共同培养对产AI-2信号分子的影响

4 讨论

4.1乳酸菌酵母菌共生菌的筛选实验

4.2乳酸菌产AI-2信号分子实验

4.3 共培养对乳酸菌产信号分子AI-2的影响

5 结论

致谢

参考文献

附表

作 者 简 介