食品中甜蜜素、糖精钠、苯甲酸和山梨酸的分析方法研究

摘要

为了改善食品的品质和色、香、味以及为防腐和加工工艺的需要,通常在食品中加入甜蜜素、糖精钠、苯甲酸和山梨酸,这些物质若过量使用,会对人体健康造成危害。国家标准测定糖精钠和苯甲酸以及山梨酸均采用高效液相色谱法-紫外检测器测定,样品不需衍生,可直接测定,而甜蜜素在紫外区无吸收,需要衍生后采用气相色谱或高效液相色谱法单独测定,步骤繁琐,成本增加,同时限制了甜蜜素和其他甜味剂和防腐剂的同时测定,而不经衍生直接采用高效液相色谱法同时测定食品中的甜蜜素、糖精钠、苯甲酸和山梨酸的方法未见文献报道,同时针对高效液相色谱法所用仪器价格较高,不适于中、小试验室检测单独甜蜜素的需要,建立能够同时测定甜蜜素、苯甲酸、山梨酸和糖精钠的高效液相色谱方法和普适性强、简便易行并且准确的适用于中、小实验室快速测定甜蜜素的方法是十分必要的。
　　 本论文采用高效液相色谱法-示差检测器建立了同时测定食品中甜蜜素、糖精钠、苯甲酸和山梨酸的分析方法。考察了流动相的体系、配比、乙酸铵溶液的浓度、流动相的流速、柱温、检测器的温度及灵敏度设置、进样量对测定的影响,确定了最佳色谱条件:色谱柱为Novo-pak C18柱；示差折光检测器；流动相体系甲醇:乙酸铵(0.01mol/L)=3:97(V:V)；检测温度30℃,示差折光检测器灵敏度设置64；柱温30℃；流速1.0 mL/min；进样量10.0μL。在最佳实验条件下,建立了四种组分的线性回归方程,相关系数为0.9995～0.9999,线性范围为0.7～200μg/mL。仪器的最小检出浓度为0.2～1.3μg/mL,样品最小检出量甜蜜素为6.5μg/g,糖精钠为1.0μg/g,苯甲酸为1.0μg/g,山梨酸为1.0μg/g,平均回收率在89.0％～114.5％之间,相对标准偏差2.1％～3.5％,实现了7 min内对甜蜜素、糖精钠、苯甲酸和山梨酸的同时测定,此方法用于实际样品的方析,结果令人满意。
　　 同时建立了间接测定食品中的甜蜜素的紫外光度法。考察了酸性介质条件,亚硝酸钠、碘化钾浓度、用量及反应时间以及试剂加入顺序对测定的影响,得到最佳实验条件为2.5 mol/L HCl1.0 mL,2.0 mmol/L亚硝酸钠1.6 mL,反应10 min后,加入0.05mol/L的KI溶液2.0 mL,暗处放置10 min后进行测定。在最佳实验条件下,甜蜜素在1.0～14.0μg/mL范围内遵守比尔定律,线性方程为A=0.5702c-0.0006,r=0.9984,仪器的最小检出浓度为0.3μg/mL,样品最小检出量在7.5μg/g,平均回收率为102.3％～103.3％,相对标准偏差0.7％～1.3％。此方法实验成本低、普适性强,适合于常规实验室食品中甜蜜素的快速测定。

目录

文摘

英文文摘

第1章 概述

1.1 食品添加剂简介

1.2 甜味剂简介

1.2.1 糖精钠

1.2.2 甜蜜素

1.3 防腐剂简介

1.3.1 苯甲酸

1.3.2 山梨酸

1.4 甜蜜素、苯甲酸、山梨酸和糖精钠的国内外分析现状

1.4.1 分光光度法

1.4.2 电化学法

1.4.3 毛细管电泳

1.4.4 离子色谱法

1.4.5 气相色谱法与气相色谱-质谱法

1.4.6 高效液相色谱法与高效液相色谱-质谱法

1.5 选题的目的和意义

第2章 HPLC法同时测定食品中甜蜜素、糖精钠、苯甲酸和山梨酸

2.1 方法简介

2.1.1 分离原理

2.1.2 定性和定量依据

2.1.3 示差折光检测器(RID)的检测原理

2.2 实验部分

2.2.1 仪器和试剂

2.2.2 色谱条件

2.2.3 实验方法

2.3 结果与讨论

2.3.1 色谱分离类型及色谱柱的选择

2.3.2 检测器的选择

2.3.3 流动相体系的选择

2.3.4 流动相洗脱方式及配比的选择

2.3.5 乙酸铵浓度的选择

2.3.6 流动相流速的选择

2.3.7 柱温的选择

2.3.8 检测器温度的确定

2.3.9 检测器灵敏度的设置

2.3.10进样量的确定

2.3.11最佳色谱条件

2.3.12标准曲线和最小检测浓度

2.3.13样品测定

2.3.14精密度与回收率实验

2.3.15标准溶液的稳定性

2.4 小结

第3章 紫外光度法间接测定食品中的甜蜜素

3.1 方法原理

3.2 实验部分

3.2.1 仪器和试剂

3.2.2 实验方法

3.3 结果与讨论

3.3.1 吸收光谱的测定

3.3.2 酸性介质的选择

3.3.3 盐酸浓度及体积的选择

3.3.4 亚硝酸钠的反应时间、浓度及加入体积的选择

3.3.5 试剂加入顺序的影响

3.3.6 碘化钾浓度、用量及反应时间的选择

3.3.7 干扰实验

3.3.8 标准曲线的绘制

3.3.9 检出限及精密度实验

3.3.10样品测定

3.3.11回收率实验

3.4 高效液相色谱法和紫外光度法的比较

3.4.1 样品前处理比较

3.4.2 操作和测定周期的比较

3.4.3 两种方法测定结果的比较

3.5 小结

第4章 结论

参考文献

致谢