高效液相色谱法测定北五味子中主要成分的研究

摘要

近年来,化学药物毒副作用不断出现,寻找天然药物的呼声日渐高涨,中药以其独特的疗效、毒副作用少等特点,引起国际医学界的关注。我国中药材五味子在传统医学中具有很高的药用价值,但受一些自然环境的影响,有的质量达不到规定的标准而限制了进入国际市场的速度。为此对五味子的种植基地进行规范,培育高产、优质、无公害的新品种,同时建立一种高效、准确测定五味子中主要成分的方法对五味子的质量进行检测跟踪将十分必要,也为我国中药材的品质评价提供依据。
　　 本研究建立了高效液相色谱法同时测定北五味子中四种木脂素类化合物的分析方法,考察了流动相组成及配比、检测波长、柱温、流速和进样量对测定的影响,确定了最佳色谱条件:流动相为乙腈-水,梯度洗脱程序为:0～25 min乙腈:水=50:50(v/v)；25～35 min线性变化到70:30(v/v),并保持5min；40～44 min再线性变化到80:20(v/v)；DAD检测器,检测波长为五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素216 nm,五味子酯甲222 nm；柱温25℃；流速0.8 mL/min;进样量10.0μL。在最佳色谱条件下,四种化合物标准曲线的线性关系良好,相关系数为0.9994～0.9998,各组分的检出限为0.04～0.05μg/mL,平均回收率为90.23～95.24％,相对标准偏差为3.2～4.9％,实现了对四种木脂素类化合物的同时测定。
　　 通过实验建立了高效液相色谱法同时测定北五味子中多种有机酸类化合物的分析方法,考察了流动相组成及配比、缓冲溶液浓度及pH值、检测波长、柱温和流速对测定的影响,确定了最佳色谱条件:流动相为甲醇-0.01 mol/L NaH2PO3(pH=2.8),梯度洗脱程序为:0～5 min甲醇-0.01 mol/L NaH2PO3(pH=2.8)配比为2:98(v/v)；5～16 min两者配比线性变化到40:60(v/v)；DAD检测器,检测波长为0～4.7 min为210 nm,4.7～5.3 min为260 nm,5.3 min以后为210 nm；柱温25℃；流速0.8 mL/min；进样量10.0μL。在最佳色谱条件下,七种化合物标准曲线的线性关系良好,相关系数为0.9990～0.9999,各组分的检出限为0.01～2.5μg/mL,平均回收率为90.29～102.5％,相对标准偏差为1.0～4.6％,实现了对多种有机酸类化合物的快速测定。研究结果表明,两种同时测定北五味子中主要成分的分析方法灵敏准确。

目录

文摘

英文文摘

第1章 概述

1.1 五味子概况

1.2 五味子国内外市场状况

1.3 目前国内五味子的综合开发利用状况

1.3.1 食品开发

1.3.2 药品开发

1.4 五味子植物品种

1.5 五味子的药理作用

1.5.1 对中枢神经系统的作用

1.5.2 保肝的作用

1.5.3 对心血管系统的作用

1.5.4 延缓衰老的作用

1.5.5 对呼吸系统的作用

1.5.6 对代谢及免疫功能的作用

1.6 五味子的化学成分

1.6.1 木脂素类化合物

1.6.2 有机酸类化合物

1.7 五味子中主要成分的提取方法

1.7.1 木脂素类化合物的提取方法

1.7.2 有机酸类化合物的提取方法

1.8 五味子中主要成分的分析方法

1.8.1 木脂素类化合物的分析方法

1.8.2 有机酸类化合物的分析方法

1.8.3 挥发类化合物的分析方法

1.9 本课题的意义及目的

第2章 方法和原理

2.1 引言

2.2 分离原理

2.3 定性和定量依据

2.3.1 定性分析依据

2.3.2 定量分析依据

2.4 二极管阵列检测器的特点及功能

第3章 高效液相色谱法测定北五味子中木脂素的研究

3.1 实验部分

3.1.1 仪器与试剂

3.1.2 色谱条件

3.1.3 实验方法

3.2 结果与讨论

3.2.1 色谱柱的选择

3.2.2 流动相体系的选择

3.2.3 流动相配比及洗脱方式和洗脱程序的确定

3.2.4 检测波长的选择

3.2.5 柱温的选择

3.2.6 流速的选择

3.2.7 进样量的选择

3.2.8 样品前处理方法的确定

3.2.9 干扰实验

3.2.10最佳色谱条件

3.2.11标准曲线

3.2.12检出限和线性范围

3.2.13仪器精密度实验

3.2.14样品测定

3.2.15回收率实验

3.2.16标准溶液的稳定性

3.3 小结

第4章 高效液相色谱法测定北五味子中有机酸的研究

4.1 实验部分

4.1.1 仪器与试剂

4.1.2 色谱条件

4.1.3 实验方法

4.2 结果与讨论

4.2.1 色谱柱的选择

4.2.2 流动相体系的选择

4.2.3 检测波长的选择

4.2.4 缓冲溶液及其浓度的选择

4.2.5 缓冲溶液酸度的选择

4.2.6 流动相配比及洗脱方式和洗脱程序的确定

4.2.7 柱温的选择

4.2.8 流速的选择

4.2.9 样品前处理方法的确定

4.2.10干扰实验

4.2.11最佳色谱条件

4.2.12标准曲线

4.2.13检出限和线性范围

4.2.14仪器精密度实验

4.2.15样品测定

4.2.16回收率实验

4.2.17标准溶液的稳定性

4.3 小结

第5章 结论

参考文献

致谢

攻读学位期间发表的论文