优良双歧杆菌的筛选及其生理功能研究

摘要

双歧杆菌作为人和动物肠道益生菌群的重要组成部分,具有促进体内营养物质的消化吸收、生物拮抗作用、提高免疫力和抗癌等生理功能。本课题从健康新生儿、婴儿及成人粪便中有目的性、针对性地筛选到一株耐酸、耐胆盐的双歧杆菌,并对其益生功能进行了研究。主要研究成果如下:
　　(1)双歧杆菌的筛选和鉴定。利用添加 X-Gal的改良 MRS作为选择性培养基初筛得到75株疑似双歧杆菌的菌株,经耐酸耐胆盐复筛、生理生化鉴定及分子生物学鉴定后,确定一株优良菌株 NCU712为长双歧杆菌。
　　(2) NCU712的生长曲线。NCU712代谢葡萄糖产生乳酸、乙酸等有机酸,0-4 h为延滞期,4-16 h为对数生长期,16-24 h为稳定期,24 h之后,菌体进入衰亡期。
　　(3) NCU712的胃肠道耐受性研究。在胃液 pH2.5和3.0时,NCU712的 D值分别为30.42、92.97 min;菌体在胃液 pH3.5和4.0的环境中,活菌数在培养过程中略有上升。人工肠液作用4.0 h后,活菌数仍有108 CFU/mL,且在0.30％胆盐环境中培养24 h后,活菌数仅下降一个数量级。
　　(4) NCU712的黏附性能研究。稳定期黏附性能最好,当菌体浓度<108 CFU/mL时,NCU712的黏附指数随菌体浓度升高而增大,随后黏附指数变化不显著;共培养时间对菌体黏附性能影响在作用2.0 h之后达到饱和;NCU712在中性环境的黏附性能最好。
　　(5) NCU712的抗氧化性能研究。增大样品加入量,活菌体、菌体破碎物、CFS的 DPPH、羟自由基清除率、总还原力、抗脂质过氧化率等抗氧化性能指标均升高,且 CFS的 DPPH清除率远高于阳性对照 Vit C的清除率,最高可达100%,羟自由基清除率活菌体最高,CFS次之。
　　(6) NCU712的抑菌性能研究。NCU712对7株常见致病菌有较好的抑菌效果,且发酵液抑菌性普遍比无菌上清液好。抑菌圈直径大小随发酵时间延长而增大,当发酵时间大于28 h时,抑菌圈直径变化不显著。NCU712的代谢产物可延长沙门氏菌的延滞期,缩短对数期,当添加量大于12%时,沙门氏菌的生长被完全抑制,说明 NCU712对沙门氏菌的生长有较好的抑制作用。

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第 1 章 引言

1.1 双歧杆菌生物学特性

1.2 双歧杆菌生理作用

1.3 双歧杆菌分离筛选的研究进展

1.4 研究内容及意义

第 2 章 双歧杆菌筛选分离及鉴定

2.1 试验材料

2.2 试验方法

2.3 结果分析

2.4 本章小结

第 3 章 生长曲线的绘制

3.1 实验材料

3.2 试验方法

3.3 结果分析

3.4 本章小结

第 4 章 胃肠道耐受性研究

4.1 实验材料

4.2 试验方法

4.3 结果分析

4.4 本章小结

第 5 章 黏附性能研究

5.1 实验材料

5.2 试验方法

5.3 结果分析

5.4 本章小结

第 6 章 抗氧化性能研究

6.1 实验材料

6.2 试验方法

6.3 结果分析

6.4 本章小结

第 7 章 抑菌性能研究

7.1 实验材料

7.2 试验方法

7.3 结果与分析

7.4 本章小结

第 8 章 结论与展望

8.1 结论

8.2 展望

致谢

参考文献

攻读学位期间的研究成果