茶叶中生物胺UPLC检测方法的建立及加工工艺对其含量的影响

摘要

生物胺普遍存在于各种动植物组织中，是生物有机体的重要生理活性成分。生物胺主要在机体生长过程中起到生理调节的作用，参与不同生理过程，包括在细胞合成中维持细胞膜的稳定、调节细胞中核酸与蛋白质的合成、参与果实发育和衰老过程等。茶叶作为世界三大无酒精饮料之一，其化学成分的研究备受关注。生物胺的检测方法在多种发酵食品、发酵酒精饮料、水产品和肉类中均有报道，但很少有关于茶叶中生物胺检测方法的研究。本试验建立了UPLC-紫外检测方法对茶叶中的七种生物胺进行了测定，得到以下结果:
　　1.本研究以苯甲酰氯为衍生试剂，采用超高效液相色谱(UPLC)-紫外检测方法，建立了茶叶中生物胺的检测方法。使用该方法测定的生物胺分离效果较好，各生物胺标准品线性关系良好，相关系数均大于0.990。以0.4M HClO4溶液作为提取溶剂，对茶叶中的生物胺进行提取和纯化，各生物胺平均回收率在72.3％～94.5％之间，精密度、重复性RSD均小于5％，此方法可行有效。
　　2.除白荼外，其余5种茶叶样品均能检测出7种生物胺。茶叶中生物胺含量普遍偏低，但不同种类生物胺含量差距很大。茶叶中含量较多的生物胺有腐胺、精胺、亚精胺和酪胺，其中黑茶中腐胺和酪胺含量最高，分别为1.19μg/g和21.42μg/g;绿茶中精胺、亚精胺、色胺和苯乙胺含量均很高，分别为4.13μg/g、2.90μg/g、1.16μg/g和2.53μg/g;白茶中生物胺含量最低，腐胺、尸胺和亚精胺均检测不出。
　　3.本试验采用同一原料同时加工成六类茶的样品，在相同原料的基础上，比较不同加工方法对主要生化成分含量变化的影响，这样真实反映了不同茶类品质的化学实质，才具可比性。研究结果表明，不同种类的茶叶样品间生物胺含量差异显著，说明加工过程是引起茶叶中生物胺含量发生变化的重要因素。

目录

声明

摘要

常用缩略语

第一章 文献综述

1 生物胺的来源

2 生物胺的合成途径

3 影响生物胺合成的因素

3．1 酸碱度

3．2 温度

3．3 盐度

4 食品中生物胺的检测方法

4．1 食品样品前处理

4．2 生物胺的定性定量检测方法

5 生物胺的衍生化试剂

5．2 苯甲酰氯

5．3 邻苯二甲醛(OPA)

5．4 荧光胺

5．5 氯甲酸芴甲酯

6 茶叶中生物胺的研究概况

7 研究意义

第二章 茶叶中生物胺的超高效液相色谱-柱前衍生检测方法建立

1．1 仪器与设备

1．2 材料与试剂

1．3 试验方法

2 结果与分析

2．1 七种生物胺单标定性分析

2．2 标准曲线、相关系数以及检测限

2．3 精密度和加标回收率

3 讨论

3．1 茶叶样品前处理方法优化

3．2 样品衍生化条件优化

3．3 UPLC色谱条件的确定

4 小结

第三章 加工工艺对不同茶类生物胺及其他生化成分的影响

1 材料与试剂

2 试验方法

2．1 茶叶中茶多酚的检测

2．2 茶叶中游离氨基酸总量的检测

2．3 茶叶中咖啡碱含量的检测

2．4 茶叶中生物胺含量的检测

3 结果与分析

3．1 茶多酚含量差异

3．2 游离氨基酸含量差异

3．3 咖啡碱含量差异

3．4 生物胺含量差异

4 讨论

第四章 结论与展望

1 结论

2 展望

参考文献

致谢