慢乙肝患者外周血CD8+T细胞Tim-3表达及意义

摘要

目的：通过检测慢性乙型肝炎( chronic hepatitis B， CHB)患者外周血CD8+T细胞T细胞免疫球蛋白粘蛋白结构域分子-3(T cell immunoglobulin-andmucin-domain-containg molecule-3, Tim-3)的表达，进一步研究Tim-3分子对CHB患者CD8+T细胞增殖能力及HBV特异性CTL功能的影响。
　　 方法：
　　 1、流式细胞技术检测58例CHB患者和16例健康体检者外周血单个核细胞( peripheral blood mononuclear cell, PBMC)中CD8+T细胞Tim-3表达水平。
　　 2、羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(5,6- carboxyfluorescein diacetate,sucanimidyl ester, CFSE)标记9例（58例检测Tim-3表达CHB患者中9例）患者外周血PBMC,IL-2维持，培养7天；流式细胞技术结合CFSE技术检测Tim-3mAb阻断Tim-3/Tim-3配体(Tim-3L)通路前后，CHB患者外周血PBMC中CFSElowCD8+T淋巴细胞比例的改变。
　　 3、流式细胞术检测CHB患者组织相容性白细胞抗原-A2(histocompatibilityleukocyte antigen-A2, HLA-A2)分型。
　　 4、HBcAg18-27(序列：FLPSDFFPSV)多肽刺激下采用酶联免疫斑点(enzyme- linkedimmunosorbent spot, ELISPOT)技术检测Tim-3mAb阻断Tim-3/Tim-3L通路前后，9例(另取检测Tim-3表达58例中9例CHB患者)HLA-A2阳性患者外周血PBMC中产生干扰素γ（Interferon gamma, IFN-γ）的HBV特异性CTL数量的改变。
　　 结果：CHB患者外周血PBMC中CD8+T淋巴细胞Tim-3分子表达水平较健康对照显著升高；Tim-3mAb阻断Tim-3通路后较阻断前CHB患者外周血CD8+T细胞增殖能力明显增强；Tim-3mAb阻断Tim-3通路后较阻断前CHB患者外周血HBV特异性CTL数量显著增加。
　　 结论： CHB患者外周血CD8+T细胞Tim-3分子表达明显升高，阻断Tim-3/Tim-3L通路能缓解CHB患者外周血CD8+T细胞以及病毒特异性CTL功能低下的状态。这对于阐明乙型肝炎病毒感染慢性化机制有重要意义。

目录

文摘

英文文摘

缩略词表

前言

第一部分 慢乙肝患者外周血CD8+T细胞Tim-3表达

材料和方法

1、材料

2、方法

3、统计学处理

结果

讨论

第二部分 Tim-3表达对慢乙肝患者外周血CD8+T细胞功能的影响

材料和方法

1、材料

2、方法

3、统计学处理

结果

讨论

结论

参考文献

Tim-3及其配体在免疫应答中的调节作用综述

参考文献

攻读硕士学位期间发表学术论文

致谢