孕激素对人子宫内膜癌细胞系Ishikawa影响的蛋白质组学研究

摘要

本文旨在比较人子宫内膜癌细胞系Ishikawa在孕激素处理前后蛋白质表达谱的变化，从而更深入地了解孕激素治疗子宫内膜癌的作用机理，为改善药物疗效，解决孕激素治疗中所出现的问题，寻找更好的治疗方法提供新线索。　　本实验MTT法检测甲地孕酮抑制Ishikawa细胞生长的半抑制浓度，测定药物作用后细胞凋亡率与细胞内钙离子浓度的变化；利用固相梯度双向凝胶电泳技术建立药物处理前后细胞总蛋白双向凝胶电泳图谱，经PDQuest软件分析，选取差异表达的蛋白质点进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析，获得肽质量指纹图谱，Mascot软件搜索NCBInr数据库鉴定蛋白质；运用半定量RT-PCR技术分析部分差异蛋白点的mRNA水平差异。　　本研究建立了孕激素处理前后的Ishikawa细胞双向蛋白质电泳图谱，找到了部分可能与孕激素治疗相关的蛋白，发现孕激素通过干预雌激素的代谢等多条途径发挥作用。这为进一步了解孕激素的作用机制，改善孕激素的疗效提供了依据。

目录

文摘

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前言

实验路线

第一章甲地孕酮对人子宫内膜癌系Ishikawa生长的抑制

1.1材料和方法

1.1.1材料

1.1.2主要方法

1.2实验结果

1.3讨论

1.4小结

第二章甲地孕酮对子宫内膜癌系Ishikawa细胞蛋白质表达谱的影响及差异蛋白点鉴定

2.1材料和方法

2.1.1材料

2.1.2主要方法

2.2实验结果

2.3讨论

2.4小结

第三章子宫内膜癌细胞中部分差异表达蛋白基因mRNA水平检测及分析

3.1材料和方法

3.1.1材料

3.1.2主要方法

3.2结果

3.3讨论

3.4小结

结论

参考文献

综述一子宫内膜癌激素治疗研究

一.激素EC的治疗理论背景

二.EC的激素治疗

参考文献

综述二子宫内膜癌的诊断研究进展

一.高危人群筛查

二.诊断手段

参考文献

致谢

攻读学位期间已发表论文及参加的课题