TGF-β1诱导胃癌细胞BGC823和SGC7901的凋亡及机制研究

摘要

目的：转化生长因子(TGF-β1)诱导胃癌细胞SGC7901和BGC823凋亡作用及其机制的研究。 方法：通过流式细胞术和Hoechst33258染色法检测TGF-βl处理前后SGC7901和BGC823细胞凋亡率的改变；Western Blot检测活性Caspase3表达量的改变。通过Western Blot检测TGF-βl作用两种细胞不同时间点p-JNK、p-p38、p-Smad2的表达量改变；免疫细胞化学检测P-Smad2在TGF-β1作用各时间点的细胞内定位。p38特异性抑制剂SB203580预处理胃癌细胞BGC823后，通过流式细胞术检测TGF-β1对该种细胞凋亡率的影响。 结果： 1、流式细胞术分析表明TGF-βl作用BGC823细胞后凋亡率明显升高(P0.05)，三个时间点凋亡率分别为0.92％、1.02％、1.54％。 2、Hoechsd3258染色法得到与流式细胞术类似结果。BGC823细胞Oh组、24h组和48h组凋亡核百分率分别为2.564±0.635％、4.3364±1.504％和7.7384±2.204％，PO.05)。 3、TGF-β1作用BGC823细胞48h后，活性Caspase-3表达明显高于Oh组以及24h组(P<0.05)，而TGF-βl作用SGC790l细胞后Oh组、24h组和48h组活性Caspase-3表达量未见明显改变(P>0.05)。 4、TGF-βl作用胃癌细胞BGC823 15min后，p-Smad2表达量达最高，并且在该时间点出现p-Smad2的核转移：同时p-p38和p-JNK表达量达最高，随着时间延长逐渐下降，至120rain几乎未见表达。 5、TGF-β1作用胃癌细胞SGC7901 60min后，p-Smad2表达达最高并出现核转移；p-JNK表达亦逐渐升高，作用至30min时表达量最高；但它并不能引起P-p38表达量的明显改变。 6、SB203580预处理的BGC823细胞在TGF-βl作用后凋亡率尽管升高明显，Oh、24h以及48h凋亡率分别为1.21％、2.60％、21.5％P＜0.05)，但其48h凋亡率明显低于SB203580未处理组(P<0.05)。 结论： l、外源性TGF-βl可明显诱导胃癌细胞BGC823凋亡，但对SGC7901细胞的凋亡无明显影响。 2、TGF-βl可激活胃癌细胞BGC823中Smads、p38以及JNK通路，并可通过p38以及其他通路诱导细胞凋亡；TGF-βl无法诱导SGC790l细胞凋亡可能是由于Smad8以及JNK通路后段和／或p38通路受阻所致。

目录

文摘

英文文摘

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第一章前言

第二章材料与方法

第三章结果

第四章讨论

第五章结论

第六章参考文献

第七章综述肿瘤抑制基因在胃癌发生中的作用及机制

致谢

攻读学位期间的研究成果