肺腺癌细胞的原代培养和肺腺癌细胞体外致瘤能力的差异性

摘要

目的：获得体外培养的原代肺腺癌细胞，分析不同的细胞分离方法及培养基的选择对肺腺癌细胞体外原代培养成功率的影响，明确最佳的细胞分离及培养方法。并初步证实肺腺癌细胞体外致瘤能力的差异性。 方法：选取5例经病理诊断证实的肺腺癌标本，每个标本分别用不同的细胞分离方法和不同的培养基培养；共分四组，A组：组织块法+含血清培养基，B组：机械法+含血清培养基，C组：组织块法+无血清培养基，D组：机械法+无血清培养基；并在显微镜下观察细胞的生长情况。每组细胞分别在接种1周、2周、3周、4周后，计数细胞总数和肺腺癌细胞数所占的比率，所得数据进行两因素水平的析因分析。用培养获得的肺腺癌细胞进行琼脂克隆，培养1周后，显微镜下计算细胞克隆数。 结果：机械法获得的细胞(49.41±2.7×104)比组织块法(41.72±5.1×104)稍多，但是没有统计学意义(P=0.137)。机械法肺腺癌细胞所占比例(59.49±4.0％)明显高于组织块法(37.67±3.1％)，并且有统计学意义(P=0.021)。含血清培养基对细胞生长的促进作用明显高于无血清培养基，并有统计学意义(P=0.035)。无血清培养基对成纤维细胞的抑制作用明显，有统计学意义(P=0.005)。培养获得的肺腺癌细胞克隆形成率平均在20％左右。 结论：机械法和无血清培养基在提高肺腺癌细胞体外原代培养的成功率上有优势。本实验培养的原代肺腺癌细胞其体外具有一定致瘤能力，细胞克隆形成率约20％。但与目前标准的肺腺癌细胞株体相比，致瘤能力较弱。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章前言

第二章材料与方法

2.1材料

2.2方法

第三章结果

3.1肺腺癌细胞的体外原代培养

3.2不同方法分离、培养的原代细胞比较

3.3细胞克隆部分

第四章讨论

第五章结论

第六章参考文献

第七章综述 肿瘤干细胞的研究进展

附表

致谢