毛葱水溶性多糖提取工艺优化及其结构分析

摘要

本文采用三种方法即传统水提法、超声波提取法、超声波-微波协同法提取毛葱水溶性多糖;并分别优化其提取工艺参数;对三种方法提取的毛葱水溶性多糖进行性质分析及结构表征;并对三种方法所得毛葱水溶性多糖的抗氧化活性进行分析对比。通过比较得出超声波-微波协同法所得毛葱水溶性多糖得率最高、抗氧化活性最好;因此;将超声波-微波协同法所提取的毛葱水溶性多糖进行分离纯化;检测单糖组成及利用核磁分析纯化后组分的结构。主要研究结果如下： 1. 毛葱水溶性多糖的传统水提法工艺优化 通过单因素试验及响应面试验;确定了毛葱水溶性多糖的传统水提法的最佳工艺：当液料比 33:1 (mL/g) ;温度 76℃;时间 4h 时;毛葱水溶性多糖得率最高;为（6.93±0.71）%。 2. 毛葱水溶性多糖的超声波辅助法工艺优化 通过单因素试验及响应面试验;确定了毛葱水溶性多糖的超声波辅助法的最佳工艺：当液料比26:1（mL/g）;超声波功率400W;时间31min时;毛葱水溶性多糖的得率最高;为（9.88±0.59）%。 3. 毛葱水溶性多糖的超声波-微波协同法工艺优化 通过单因素试验及响应面试验;确定了毛葱水溶性多糖的超声波-微波协同法的最佳工艺：当液料比17:1(mL/g);超声波功率360W;微波功率 200W;协同时间 16min时;毛葱水溶性多糖得率最高;为（11.92±0.13）%。 4. 毛葱水溶性多糖性质测定及结构表征 溶解性实验结果表明：毛葱水溶性多糖可溶水;不溶于乙醇、无水乙醚等有机溶剂;显色反应试验结果表明：毛葱水溶性多糖含有糖醛酸;不含有淀粉及酚类物质;结构表征结果：紫外光谱分析得出三种方法所提取的毛葱水溶性多糖中无核酸和蛋白质的干扰;傅里叶变换红外光谱分析显示毛葱水溶性多糖具有多糖类的特征吸收峰;高效凝胶渗透色谱分析显示毛葱水溶性多糖的组成不是均一的。 5. 毛葱水溶性多糖清除自由基能力的测定 传统水提法、超声波辅助法、超声波-微波协同法所提取的毛葱水溶性多糖对DPPH自由基、羟基自由基及超氧阴离子自由基均具有一定的清除效果;且在一定的浓度范围内对清除作用呈现良好的剂量-效应关系。超声波-微波协同法所提取的毛葱水溶性多糖的抗氧化活性高于超声波辅助法及传统水提法。 6. 超声波-微波协同法提取的毛葱水溶性多糖的分离纯化、单糖组成及结构分析 超声波-微波协同法提取的毛葱水溶性多糖经DEAE-52纤维素柱及Sephadex G-100纯化后得到纯化多糖组分;经GC-MS分析可知;该纯化多糖的单糖组成主要为葡萄糖和半乳糖糖醛酸;其次为阿拉伯糖、鼠李糖、木糖、甘露糖、果糖、半乳糖及葡糖糖醛酸。利用核磁共振 H 谱与 C 谱对该纯化多糖进行结构分析;判断该纯化多糖是由α-（1?4）糖苷键和β（1?6）糖苷键链接的吡喃型葡萄糖。

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