青砖茶清除自由基作用及对前脂肪细胞增殖的影响

摘要

青砖茶属于我国特种黑茶，主产于湖北，以咸宁地区为主，用老青茶作为原料，经渥堆、压制而成，至今已有100多年的生产历史，是我国内蒙古等西北地区人民生活中不可或缺的天然饮品。已有动物试验表明，青砖茶对试验大鼠具有显著的降低体重、减肥、降脂、抗氧化等功能，酶学实验表明，青砖茶对脂肪酶和淀粉酶具有抑制作用。为了进一步探讨青砖茶降脂减肥作用的机理，本文研究了青砖茶不同极性溶剂萃取组分及乙酸乙酯、正丁醇萃取层Sephadex LH-20柱层析组分主要活性成分及其清除自由基效果，同时，结合细胞生物学研究了青砖茶不同极性溶剂萃取组分对3T3-L1前脂肪细胞增殖作用的影响，为青砖茶降脂减肥作用机理研究提供理论依据。
　　 1.青砖茶不同萃取组组分活性成分分析及清除自由基作用研究对青砖茶各萃取层中茶多酚及其氧化产物进行了分析，结果表明，乙酸乙酯层和正丁醇层中茶多酚和没食子酸含量最高，分别为78.189 mg/g、15.258 mg/g；各萃取层中茶黄素含量均较少，正丁醇层中茶黄素含量最高，沉淀层中茶褐素含量最高。
　　 采用DPPH法，黄嘌呤氧化酶法，D-脱氧核糖-铁体系法比较了青砖茶不同萃取组分的体外清除自由基能力大小。结果显示，青砖茶乙酸乙酯和正丁醇萃取层清除DPPH自由基效果最好，其IC50值分别为6.585μg/mL、17.334μg/mL；沉淀层清除O2-·自由基的效果最好，其IC50值为2.512 mg/mL，乙酸乙酯层和正丁醇层次之；原茶汤层、氯仿层、沉淀层和剩余水层在清除·OH自由基时，随着浓度的增大，清除率增加，而乙酸乙酯层和正丁醇层在达到某一浓度后清除率下降。
　　 2.青砖茶乙酸乙酯、正丁醇萃取层分离样品清除自由基作用研究清除DPPH自由基和O2·自由基作用最强，但是弱于乙酸乙酯层分离样品清除自由基能力。
　　 液质结果分析显示，QEF2中主要含有没食子酸和EGC，且含量最高，分别为198.205 mg/g、163.026mg/g； QEF8中主要为酯型儿茶素ECG和EGCG，含量分别为111.141 mg/g、222.902 mg/g；其它各样品中也含有少量的儿茶素；QBF2中没食子酸含量最高，儿茶素类主要为酯型儿茶素ECG和EGCG，QBF1中儿茶素总量最高，为64.731 mg/g:正丁醇层中主要为没食子酸、茶黄素、原花色素聚合物或双没食子酸酯。
　　 3.青砖茶不同萃取层对前脂肪细胞增殖作用的影响利用LDH法研究了青砖茶不同萃取层在不同浓度下对3T3-L1前脂肪细胞毒性作用，结果显示，在各萃取层浓度范围为100-500μg/mL时对细胞没有毒性。
　　 采用MTT比色法，研究了青砖茶各萃取层对3T3-L1前脂肪细胞增殖作用的影响，结果表明，乙酸乙酯层对细胞增殖抑制作用最强，正丁醇层次之。