滤泡辅助性T细胞在儿童特发性肾病综合征低IgG血症中的作用初探

摘要

目的：探讨滤泡辅助性T细胞(T follicular helper cell, Tfh)在儿童特发性肾病综合征(idiopathic nephritic syndrom,INS)低IgG血症中的可能作用和机制。
　　方法：激素敏感型INS患儿40例，其中INS初发组和INS缓解组各20例，同年龄正常对照组20例。采用流式细胞术检测外周血中循环Tfh细胞、CD19+CD27-IgD+B细胞(初始B细胞)、CD19+CD27+IgD+B细胞(转化前记忆B细胞)、CD19+CD27+IgD-B细胞(转化后记忆B细胞)、CD19+CD27+IgD-CD38high B细胞(浆细胞)比例；Real-Time PCR检测CD4+T细胞PI3K、AKT、mTOR、mTORC1、mTORC1、BCL-6、Blimp-1及IL-21基因表达；ELISA检测血浆IL-2、IL-21及IL-6浓度,免疫荧光吸附试验检测血浆丙二醛(malondialdehyde，MDA）浓度。INS初发患儿T细胞分别在正常儿童血浆和INS患儿血浆培养后应用流式细胞术检测Tfh细胞比例、PCR检测mTOR、mTORC1的表达。
　　结果：与正常对照组相比，①INS初发组患儿外周血Tfh比例明显降低（P＜0.05），缓解组Tfh比例无明显差异（P＞0.05）；②初发组患儿转化后记忆B细胞和浆细胞比例明显降低（P＜0.05），缓解组无明显差异（P＞0.05）③初发组患儿Tfh细胞转录因子BCL-6表达明显降低（P＜0.05），Blimp-1、PI3K、AKT、mTOR、mTORC1表达明显增高（P＜0.05），缓解组无明显差异（P＞0.05）；mTORC2表达无明显差异；INS初发组患儿CD4+T细胞IL-21mRNA表达明显降低（P＜0.05）；④INS初发组患儿血浆IL-2明显降低（P＜0.05），IL-21、IL-6浓度呈下降趋势，统计学分析无显著差异（P＞0.05）；⑤INS初发组患儿MDA浓度显著增高（P＜0.05）；⑥INS患儿CD4+T细胞加正常血清培养后INS患儿mTOR基因表达明显降低（P＜0.05），Tfh细胞比例明显增加（P＜0.05）。
　　结论：①Tfh比例下降影响B细胞分化成熟，可能是导致INS患儿低IgG血症的原因之一；② IL-2、IL-21等细胞因子微环境紊乱导致的BCL-6/Blimp-1表达失衡,高脂血症和IL-2通过PI3K-AKT途径引起mTOR（mTORC1）过表达等多种因素，可能是抑制INS患儿Tfh细胞分化的重要原因。

目录

声明

中英文缩略词表

前言

1材料与方法

1.1 实验对象与技术路线

1.2 主要实验试剂

1.3 主要仪器及耗材

1.4 实验方法

1.5 统计学方法

2结果

2.1 对照组、INS初发组和INS缓解组临床资料

2.2对照组、INS初发组和INS缓解组免疫球蛋白及IgG亚类结果

2.3 INS患儿外周血Tfh细胞比例明显下调

2.4 Tfh细胞相关因子检测结果

2.5 不同分化阶段B细胞分化改变

2.6血浆IL-2、IL-21、IL-6及CD4+T 细胞IL-21表达结果

2.7 CD4+T细胞IL-2R、mTOR及相关基因检测结果

2.8脂质代谢终产物MDA（丙二醛）检测结果

2.9血浆纠正对INS患儿Tfh细胞的影响

3 讨论

3.1 INS患儿Tfh细胞比例下调可能是INS低IgG血症的原因之一

3.2 细胞因子微环境紊乱导致的 BCL-6/Blimp-1 表达失衡，可能是引起INS患儿Tfh比例下调的原因之一

3.3 血浆IL-2浓度增高和高脂血症导致mTOR过表达可能是Tfh细胞比例下调的另一重要原因

3.4 结语及展望

4 结论

参考文献

综述:儿童特发性肾病综合征低IgG血症及滤泡辅助性T细胞研究进展

致谢

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